进口elisa试剂盒的样本处理及要求

进口elisa试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中血清素/血清胺(st)水平。用纯化的血清素/血清胺(st)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入血清素/血清胺(st),再与hrp标记的血清素/血清胺(st)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过洗涤后加底物tmb显色。tmb在hrp酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的血清素/血清胺(st)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(od值),通过标准曲线计算样品中血清素/血清胺(st)浓度。
进口elisa试剂盒标本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融
2.不能检测含nan3的样品,因nan3抑制辣根过氧化物酶的(hrp)活性。
进口elisa试剂盒样本处理及要求:
1.血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2.血浆:可用edta或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2-8°c1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3.组织匀浆:用预冷的pbs(0.01m,ph=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的pbs(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9ml的pbs,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在pbs中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4.细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
关键词:酶标仪

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