丰寿总结：血清总蛋白质的测定办法
1、凯氏定氮法仍然是树立各个具体办法时选用的参阅规范办法。
2、双缩脲比色法是现在首要*的蛋白质定量办法。办法操作简便，尽管双缩脲试剂有大同不异。其间酒石酸钾纳能够稳定在碱性溶液中的铜离子，含有dian化物作为抗氧化剂。双缩脲反响生成的复合物其吸收峰为540nm。可选用*的规范牛血清白蛋白作为规范品，经称量，必要时用凯氏定氮法标定。各地质控中心提供的混合规范血清可作为第二参阅，血清用量100μl，在10-120g/l浓度范围内呈杰出线性关系，批内cv值<2%
3、染料结合法 蛋白质可与某些染料特异结合，如氨基黑与考马亮蓝。这一性质除了能够用于电泳后的蛋白质区带染色，亦可用于总蛋白质的定量。缺陷是多种蛋白质与染料的结合力不一致。考马亮蓝在与蛋白质结合后的吸收峰从465nm移向595nm，这一性质可用分光光度法来定量检测。
4、选用沉淀反响进行散射比浊法 用磺柳酸、三氯醋酸等配方，此办法甚为简便，不需特殊仪器，技能关键在于：①选择试剂浓度及温度；②混匀技能；③选用的规范；④待测标本中的蛋白浓度。
5、选用280nm和215/225紫外吸收值，计算蛋白质含量280nm 是由于蛋白质分子中存在芳香族氨基酸所致。办法的特异性和准确性受蛋白分子中该种氨基酸的含量比例影响甚大。尿酸和肝红素在280nm附近有搅扰。紫外区200-225nm是肽健的强吸收峰。在此区域其吸收值为280nm的10-30倍，将血清稀释1000-2000倍能够消除搅扰物质的影响。
6、基于蛋白分子中含有*和*而使用的酚试剂比色法由于各种蛋白质分子中上述两种氨基酸的组成比例不同，特别是白蛋白含*为0.2%，而γ-球蛋白中含量达2%-3%，导致较大的差异。lowry的改良法在酚试剂中参加cu2++，集中原法和双缩脲反响两者的效果，使呈色灵敏度进步。其间75%的呈色依赖于cu2++。反响产品吸收峰在650-750nm，办法灵敏度为双缩脲办法的100倍左右。有利于检测较微量的蛋白质。但试剂反响仍易受多种化合物的搅扰。
7、染料结合法 蛋白质可与某些染料特异结合，如氨基黑与考马亮蓝。这一性质除了能够用于电泳后的蛋白质区带染色，亦可用于总蛋白质的定量。缺陷是多种蛋白质与染料的结合力不一致。考马亮蓝在与蛋白质结合后的吸收峰从465nm移向595nm，这一性质可用分光光度法来定量检测
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2、双缩脲比色法是现在首要*的蛋白质定量办法。办法操作简便，尽管双缩脲试剂有大同不异。其间酒石酸钾纳能够稳定在碱性溶液中的铜离子，含有dian化物作为抗氧化剂。双缩脲反响生成的复合物其吸收峰为540nm。可选用*的规范牛血清白蛋白作为规范品，经称量，必要时用凯氏定氮法标定。各地质控中心提供的混合规范血清可作为第二参阅，血清用量100μl，在10-120g/l浓度范围内呈杰出线性关系，批内cv值<2%
3、染料结合法 蛋白质可与某些染料特异结合，如氨基黑与考马亮蓝。这一性质除了能够用于电泳后的蛋白质区带染色，亦可用于总蛋白质的定量。缺陷是多种蛋白质与染料的结合力不一致。考马亮蓝在与蛋白质结合后的吸收峰从465nm移向595nm，这一性质可用分光光度法来定量检测。
4、选用沉淀反响进行散射比浊法 用磺柳酸、三氯醋酸等配方，此办法甚为简便，不需特殊仪器，技能关键在于：①选择试剂浓度及温度；②混匀技能；③选用的规范；④待测标本中的蛋白浓度。
5、选用280nm和215/225紫外吸收值，计算蛋白质含量280nm 是由于蛋白质分子中存在芳香族氨基酸所致。办法的特异性和准确性受蛋白分子中该种氨基酸的含量比例影响甚大。尿酸和肝红素在280nm附近有搅扰。紫外区200-225nm是肽健的强吸收峰。在此区域其吸收值为280nm的10-30倍，将血清稀释1000-2000倍能够消除搅扰物质的影响。
6、基于蛋白分子中含有*和*而使用的酚试剂比色法由于各种蛋白质分子中上述两种氨基酸的组成比例不同，特别是白蛋白含*为0.2%，而γ-球蛋白中含量达2%-3%，导致较大的差异。lowry的改良法在酚试剂中参加cu2++，集中原法和双缩脲反响两者的效果，使呈色灵敏度进步。其间75%的呈色依赖于cu2++。反响产品吸收峰在650-750nm，办法灵敏度为双缩脲办法的100倍左右。有利于检测较微量的蛋白质。但试剂反响仍易受多种化合物的搅扰。
7、染料结合法 蛋白质可与某些染料特异结合，如氨基黑与考马亮蓝。这一性质除了能够用于电泳后的蛋白质区带染色，亦可用于总蛋白质的定量。缺陷是多种蛋白质与染料的结合力不一致。考马亮蓝在与蛋白质结合后的吸收峰从465nm移向595nm，这一性质可用分光光度法来定量检测
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