vero 细胞系广泛应用于人用疫苗的生产, 如:轮状病毒疫苗、流行性乙型脑炎病毒疫苗、流感病毒疫苗、肠道病毒 71 型疫苗等,这是基于其*的特性。vero 细胞因其固有的基因缺陷,不能表达抗病毒蛋白干扰素。barrett 等试图用新城疫病毒、仙台病毒、风疹病毒感染 vero 细胞产生干扰素,结果表明 vero 细胞不能表达分泌干扰素蛋白。
在相同条件下,改用bsc-1 细胞和其他灵长类动物细胞重复这一实验时,这些细胞系可以表达分泌大量干扰素蛋白。有文献报道,vero 细胞可能存在 β 和 α 基因的缺陷,不能表达干扰素蛋白。vero 细胞的广泛易感特性促进了使用 vero 细胞生产疫苗事业的发展。
除了以上优势,与生物制品生产用原代细胞系和二倍体细胞系相比,vero 细胞还具有以下优势:
,来源方便,容易建立细胞库和保存,可连续传代,生长速度快;
第二,vero 细胞遗传性状稳定,恶性化概率小,无外源性污染,具有良好的生物安全特性;
第三,vero 细胞对多种病毒敏感,生产的病毒滴度高;
第四,vero 细胞对培养条件要求不高,在微载体表面能良好的贴附生长,易在生物反应器放大培养。
vero 细胞在疫苗的生产从轮状活病毒疫苗到流感减毒活疫苗,再到灭活全病毒疫苗的发展都证明 vero 细胞在一系列病毒性疫苗发展中具有重要的价值。vero 细胞被批准用于人用疫苗的生产后,生产的人用疫苗是 barrett 等生产的脊髓灰质炎灭活疫苗(*),之后 vero 细胞用于狂犬病毒疫苗和口服脊髓灰质炎病毒疫苗(opv) 等多种人用疫苗生产。vero 细胞在病毒性疫苗生产的应用已有 30 年之久,尤其是狂犬病毒疫苗和脊髓灰质炎疫苗。
疫苗的作用主要是预防传染性疾病、新型流行病及暴发流行,尤其如乙型肝炎呈世界流行,是性的健康问题。健康人群是主要的接种对象,因此,保证疫苗的质量和安全性是重要的问题,其关键在于做好生产方式和过程的把关,保证生产用原材料的安全和质量。
在疫苗生产过程中,为了获得高滴度高质量的病毒培养液,需要高密度的培养细胞基质。细胞高密度培养主要从培养基着手,通过补充某些营养添加因子优化培养基促进细胞生长。常用的添加因子是新生小牛血清,它能够提供给 vero细胞在体外贴附培养的必需物质。
贴壁因子、生长因子、激素、营养物质,在体外模拟稳定的环境,促进细胞高密度生长。但是血清是成分复杂的混合物,其所含的组分不*明确,因此,细胞培养技术中血清的使用存在诸多的缺点和风险。
缔一生物为您介绍一款可用于vero细胞无血清培养的培养基,由上himedia公司生产的sfre199-1和sfre199-2。它们作为基础培养基,是m199的改良款。其主要的区别是改变了m199培养基的部分营养成分配方,调整了氨基酸和葡萄糖的浓度,并加入硫酸锌、丙酮酸钠和*锌胰岛素。另外,还降低了硝酸铁、黄嘌呤和*的浓度。其中sfre 199-1有hank's盐;sfre 199-2含有earle's盐,不含胰岛素,可在使用前自行添加。
据报道,用含5%新生牛血清的改良m199和传统m199进行了对比,发现两种培养基培养72h时,vero细胞均已长成致密单层,使用改良m199培养基培养的细胞密度平均值显著高于进口m199培养基。
缔一生物作为himedia公司在中国的代理商,在细胞培养、微生物培养及检测领域,一如既往地为您带来的服务。
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