辉瑞/biontech在新冠mrna疫苗的生产过程中使用到hepes,同时审评报告反复强调了该辅料的无rnase的关键属性。
结合2016年biontech发表lpx-mrna制剂的文章中mrna原液中所采用的buffer为hepes,基本可以推断biontech采用hepes作为原液中的buffer且已获批上市的疫苗原液采用hepes作为缓冲对。
英国帝国理工大学医学院传染病系系主任robin shattock是mrna预防性疫苗领域的专家,与biontech以及pni等公司都有较为密切的合作。其团队2021年发表关于sarna体外转录体系优化的文章中,考察筛选了影响sarna体外转录的关键影响因素,最终确定了采用40mm浓度的hepes作为ivt反应体系buffer,具有更优的体外转录效果。
四、使用hepes缓冲体系时的注意事项
1、由于pai嗪基团的存在,当hepes暴露于光线中时,会产生h2o2,这对培养的细胞或其它有生物活性的物体产生毒性,同时对氧化还原敏感的物质不宜共同使用,因此hepes作为缓冲液的操作应尽量在避光条件下进行。
2、hepes在生化领域常见的使用浓度为10-25mm,当浓度低于10mm时缓冲能力较弱,不能起到较好的缓冲效果,当浓度较高时对一些细胞可能具有毒害作用。
艾伟拓长期稳定供应注射级海藻糖、蔗糖、tris/tris-hcl、hepes等生物保护剂与缓冲盐,gmp条件生产,中美双报,供注射用,超低内毒素,dnase& rnase free,符合国际主流药典标准,助力重组蛋白疫苗、mrna疫苗、腺病毒载体疫苗、脂质体、单双抗、抗体偶联药物等生物制剂生产与中外申报!
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