国产液相色谱仪的两种洗脱方式

国产液相色谱仪的洗脱方式可分为洗脱溶剂固定洗脱和梯度洗脱两种。两种洗脱方式有什么区别呢?本文将一一介绍。一、洗脱溶剂固定洗脱(一种或几种固定溶剂组成的洗脱液,有人称之为等度洗脱)
一般是采用一种或几种固定混合的溶剂作流动相,对色谱柱进行洗脱,其优点是操作简单、使用成本低(只需要一个高压泵)。其缺点是分析时间长、分析速度慢、分析效率差。目前的很多分析工作大多数采用梯度洗脱。
二、梯度洗脱
根据色谱分离理论,决定组分保留值的因素是分配系数和分配比;而分配比又叫做容量因子,它表征组分在固定相和流动相中分配量的比。梯度洗脱是用一种或多种不同极性的溶剂作为流动相,在洗脱过程中不断改变流动相组分的比例,以此调节流动相的极性,使国产液相色谱仪色谱柱流出物(样品)中的所有组分都有合适的分配比或容量因子,以保证能够在zui短的时间内,达到分离的目的。梯度洗脱可以提高柱效,加快分析速度,缩短分析时间,并且可以改善液相色谱系统中检测器的检测限,提高灵敏度。
梯度洗脱的优点:分离效率高、分析速度快;往往等度洗脱不能解决问题时,采用梯度洗脱就迎刃而解了。所以,梯度洗脱发展很快,使用非常广泛。
国产液相色谱仪在进行梯度洗脱时,由于多种溶剂混合,而且组成不断变化,因此带来一些特殊问题,必须充分重视:
1.要注意溶剂的互溶性,不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相,有些溶剂在一定比例内混溶,超出范围就不互溶,使用时更要引起注意。当有机溶剂和缓冲液混合时,还可能析出盐的晶体,尤其使用磷酸盐时需特别小心。
2.梯度洗脱所用的溶剂纯度要求更高,以保证良好的重现性。进行样品分析前必须进行空白梯度洗脱,以辨认溶剂杂质峰,因为弱溶剂中的杂质富集在色谱柱头后会被强溶剂洗脱下来。用于梯度洗脱的溶剂需*脱气,以防止混合时产生气泡。
3.每次梯度洗脱之后必须对色谱柱进行再生处理,使其恢复到初始流动相流经色谱柱,使固定相与初始流动相达到*平衡。
4.混合溶剂的粘度常随组成而变化,因而在梯度洗脱时常出现压力的变化。例如甲醇和水粘主度都较小,当二者以相近比例混合时粘度增大很多,此时的柱压大约是甲醇或水流动相时的两倍。因此要注意防止梯度洗脱过程中压力超过或色谱柱能承受的zui大压力。
以上是国产液相色谱仪的两种洗脱方式,更多信息咨询南京科捷。
关键词:液相色谱仪 色谱柱 高压泵 色谱仪

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