在分子生物学中紫外分光光度计有哪些应用？
分子生物学是在分子水平研究蛋白质、核酸等生物大分子结构与功能的学科，是生物学的前沿领域。分子生物学的研究需要对生物大分子进行检测，常用的仪器包括pcr仪、核酸提取仪等。除了专门的分子生物学仪器，通用的化学分析仪器也在分子生物学中有广泛的应用，比如紫外分光光度计。
紫外分光光度计在分子生物学中主要有以下几点应用：
1.蛋白质含量测定
(1)直接定量法：
利用紫外分光光度计直接定量检测蛋白质含量是利用蛋白质含有的*和*在紫外光区280 nm处具有大吸收的特征，根据该波长的吸光度与蛋白质浓度成正比的关系测定其含量。
直接定量法适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质。特点在于快速简便，缺点包括易受到平行物质如dna的干扰、敏感度差、要求蛋白的浓度较高等。
(2)比色法：蛋白质的组成成分氨基酸与外加的显色基团或染料反应，产生有色物质。有色物的浓度与氨基酸的数量相关，从而反映蛋白质浓度。常见方法包括bca、bradford、lowry等几种。
2.核酸浓度测定和纯度判定
核酸的大吸收波长是260 nm，蛋白质的大吸收波长是280 nm。在波长260 nm的紫外线下，1 od值光密度相当于约50 μg/ml双链dna，约40 μg/ml单链dna或rna。通过od260与od280的比值还可初步判断核酸的纯度，纯dna和rna样品的0d260/280分别为1.8和2.0，若样品中有蛋白质或酚的污染，比值将低于此值。
紫外分光光度计一般只能测定质量浓度大于0.25 μg/ml的核酸浓度。
3.细菌密度测定
通常情况下，根据经验和目测推断细菌的生长密度和生长期，而od600是用来检测细菌浓度的重要指标，是追踪液体培养物中微生物生长的标准方法。实验中以未加菌液的培养液作为空白液，再定量培养后的含菌培养液。注意受试的样品不能离心，要保持细菌悬浮状。
紫外分光光度法是基础的光谱分析方法，根据被测量物质分子对紫外-可见波段范围单色辐射的吸收或反射强度来进行物质的定量、定性或结构分析。紫外分光光度法的应用很广泛，可用于化学、材料、生物、医学、食品、环境等领域。分子生物学中的应用是指其中的一小部分。
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利用紫外分光光度计直接定量检测蛋白质含量是利用蛋白质含有的*和*在紫外光区280 nm处具有大吸收的特征，根据该波长的吸光度与蛋白质浓度成正比的关系测定其含量。
直接定量法适合测试较纯净、成分相对单一的蛋白质。特点在于快速简便，缺点包括易受到平行物质如dna的干扰、敏感度差、要求蛋白的浓度较高等。
(2)比色法：蛋白质的组成成分氨基酸与外加的显色基团或染料反应，产生有色物质。有色物的浓度与氨基酸的数量相关，从而反映蛋白质浓度。常见方法包括bca、bradford、lowry等几种。
2.核酸浓度测定和纯度判定
核酸的大吸收波长是260 nm，蛋白质的大吸收波长是280 nm。在波长260 nm的紫外线下，1 od值光密度相当于约50 μg/ml双链dna，约40 μg/ml单链dna或rna。通过od260与od280的比值还可初步判断核酸的纯度，纯dna和rna样品的0d260/280分别为1.8和2.0，若样品中有蛋白质或酚的污染，比值将低于此值。
紫外分光光度计一般只能测定质量浓度大于0.25 μg/ml的核酸浓度。
3.细菌密度测定
通常情况下，根据经验和目测推断细菌的生长密度和生长期，而od600是用来检测细菌浓度的重要指标，是追踪液体培养物中微生物生长的标准方法。实验中以未加菌液的培养液作为空白液，再定量培养后的含菌培养液。注意受试的样品不能离心，要保持细菌悬浮状。
紫外分光光度法是基础的光谱分析方法，根据被测量物质分子对紫外-可见波段范围单色辐射的吸收或反射强度来进行物质的定量、定性或结构分析。紫外分光光度法的应用很广泛，可用于化学、材料、生物、医学、食品、环境等领域。分子生物学中的应用是指其中的一小部分。
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