聚合酶链式反应（PCR）详细实验步骤
一、准备工作
1、实验器具与材料：
（1）移液枪：200ul、10ul
（2）吸头：200ul、20ul
（3）吸头台：放置200ul和20ul的吸头一个
（4）ep管1.5ml、100ul
2、实验器具的处理与准备
塑料制品：（包括吸头、ep管等）
送至高压3次，试验前将枪头放入吸头台。
3、试剂配制和准备：
（1） 双蒸水： 100ml盐水瓶内装40ml蒸馏水，送至高压，后分装到几个1。5mlep管中，-20℃中保存备用。
（2） pcr中所需要的各种试剂
二、pcr时注意事项：
佩戴一次性手套，同时避免戴上的一次性的手套接触可疑污染物。
三、pcr步骤
1、准备100ul ep管
2、依次在管中加入：（50ul反应体系）
ddh2o37.5ul×
10mm dntp1ul×
10×pcr buffer5ul×
25mm mgcl2
（加之前要摇匀）3ul×
上游引物1ul×
下游引物1ul×
模板cdna1ul
3、稍离心
4、100℃沸水浴1分钟
5、趁热加入tag酶0.5ul（冰上操作）
6、再加入50ul液体石蜡封闭
7、10000rmp离心1分钟
8、pcr条件
94℃ 1min
58℃ 50sec
72℃ 1min30sec
进行40个循环，然后72℃ 10min 完后4℃保温。
9、10000rmp离心5min
10、将下层水相转入新的0.65mlep管中，－20℃保存。
意大利ELTRA型旋转编码器的机械安装使用：
无锡冠亚plc温度控制系统ZLF-50N
弹性体凸轮转子泵的基本使用性能
螺旋输送机应用范围详细介绍
开关插座摆锤冲击试验装置使用说明
聚合酶链式反应（PCR）详细实验步骤
滑板托盘产品结构及国内外发展现状
日本比良研磨分散用氧化铝球产品特性分析
直角铣头的结构组织及特点
核酸染料要怎么用？用的时候要注意些什么？
馏程测定仪技术参数
激光焊接机哪些行业可以使用
一台电脑控制多台线切割机床的优缺点
电磁阀D3FPE50YB9HB7039900型号齐全
国标防火泥检测标准
活性炭吸附箱的相关介绍
恒温电烙铁的保养知识
如何选择四川袋式除尘器?
大功率防爆灯的三个细节你注意了吗？
在线环境监测系统包括环境监测硬件和软件两个部分
1、实验器具与材料：
（1）移液枪：200ul、10ul
（2）吸头：200ul、20ul
（3）吸头台：放置200ul和20ul的吸头一个
（4）ep管1.5ml、100ul
2、实验器具的处理与准备
塑料制品：（包括吸头、ep管等）
送至高压3次，试验前将枪头放入吸头台。
3、试剂配制和准备：
（1） 双蒸水： 100ml盐水瓶内装40ml蒸馏水，送至高压，后分装到几个1。5mlep管中，-20℃中保存备用。
（2） pcr中所需要的各种试剂
二、pcr时注意事项：
佩戴一次性手套，同时避免戴上的一次性的手套接触可疑污染物。
三、pcr步骤
1、准备100ul ep管
2、依次在管中加入：（50ul反应体系）
ddh2o37.5ul×
10mm dntp1ul×
10×pcr buffer5ul×
25mm mgcl2
（加之前要摇匀）3ul×
上游引物1ul×
下游引物1ul×
模板cdna1ul
3、稍离心
4、100℃沸水浴1分钟
5、趁热加入tag酶0.5ul（冰上操作）
6、再加入50ul液体石蜡封闭
7、10000rmp离心1分钟
8、pcr条件
94℃ 1min
58℃ 50sec
72℃ 1min30sec
进行40个循环，然后72℃ 10min 完后4℃保温。
9、10000rmp离心5min
10、将下层水相转入新的0.65mlep管中，－20℃保存。
意大利ELTRA型旋转编码器的机械安装使用：
无锡冠亚plc温度控制系统ZLF-50N
弹性体凸轮转子泵的基本使用性能
螺旋输送机应用范围详细介绍
开关插座摆锤冲击试验装置使用说明
聚合酶链式反应（PCR）详细实验步骤
滑板托盘产品结构及国内外发展现状
日本比良研磨分散用氧化铝球产品特性分析
直角铣头的结构组织及特点
核酸染料要怎么用？用的时候要注意些什么？
馏程测定仪技术参数
激光焊接机哪些行业可以使用
一台电脑控制多台线切割机床的优缺点
电磁阀D3FPE50YB9HB7039900型号齐全
国标防火泥检测标准
活性炭吸附箱的相关介绍
恒温电烙铁的保养知识
如何选择四川袋式除尘器?
大功率防爆灯的三个细节你注意了吗？
在线环境监测系统包括环境监测硬件和软件两个部分