单细胞分离的关键技术有哪些?

相信许多实验人员,都见过传统的单细胞分离设备,传统的分离方法主要有:口吸管技术、显微操作法、激光显微切割法及流式细胞法。
操作者可以将组织内单一细胞或细胞群切割下来进行研究,避免间质细胞及一些炎症细胞造成背景“污染”,可以了解到细胞的位置信息。但该方法相邻细胞容易污染,另外在组织固定及激光切割的过程中可能会破坏细胞的完整性,对细胞核酸损伤较大,从而影响后续的遗传物质的扩增。
分离微流控技术
利用口吸管技术,操作者可以在显微镜下选择形态较好的细胞,对细胞几乎无损伤,因此下游实验的成功率高,但对操作人员的熟练度要求较高。
是指通过微米级别的流道精确操控微升、毫升级别样品的技术,目前主要有微反应室、液滴技术。微流控技术在细胞分选应用方面优势巨大,可利用重力离心、流体力学、电场力等来捕获细胞,同时还可以将多种操作单元结合在一起,集细胞捕获、细胞培养、细胞裂解及后续的检测分析于一体,实现高通量、自动化、集成化。
单细胞分离关键技术:
单核液滴 (液滴只含一个细胞/菌/酶...删除空液滴,去除杂质);
激光切换 (可选双激光, 自由切换, 后续可灵活升级更换);
柔性筛选 (液滴高通量柔性筛选过程对细胞/菌活性影响很小);
耗材定制 (耗材按客户不同应用需求定制, 价格远低于进口 );
检测速度:300万个液滴/8小时; 筛选速度:150万个液滴/8小时)。

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