如何用凯氏定氮仪检测大米蛋白质
蛋白质含量是大米品质的指标之一。常用的检测蛋白质含量的凯氏定氮仪一般用于检测大豆、小麦和乳制品。凯氏定氮仪应该怎么检测大米的蛋白质含量呢？
试剂：
盐酸、氢氧化钠、浓硫酸、硼酸、甲基红：分析纯
溴甲酚绿：指示剂
尿素：99.9%
全麦粉粗蛋白质标准物质
铜催化剂：4.5 g k2so4+0.5 g cuso4﹒5h2o/片
试剂配置：
1.盐酸标准滴定溶液(0.1 mol/l)按gb/t 601-2016配置及标定。
2.氢氧化钠溶液(400 g/l) 称取4000 g氢氧化钠溶于水，冷却后稀释至10 l。
3.硼酸吸收溶液(含溴甲酚绿和甲基红指示剂)：
(1) 1%硼酸：将100 g硼酸溶于10 l纯水中。
(2) 0.1%溴甲酚绿溶液：0.1 g溴甲酚绿溶于100 ml95%乙醇中。
(3) 0.1%甲基红溶液：0.11 g甲基红溶液100 ml溶于 95%乙醇中。
(4)在10l1%的硼酸溶液中加人100 ml1%溴甲酚绿和70 ml1%甲基红溶液混匀。
试验方法
1.样品制备 用中药粉碎机粉碎大米，并过100目篩。
2.单因素试验 参考gb 5009.5- 2016及定氮仪简报，用消化炉消化样品，全自动凯氏定氮仪测定蛋白质。以蛋白质含量为指标，分别考察样品质量、浓硫酸添加量、消化温度、消化时间4个因素对大米蛋白质测定值的影响。
3.正交试验 根据单因素试验结果选取合理水平设计正交试验。
4.精密度及准确度试验 称取6个平行样品进行精密度试验，称取3个平行样品，加入尿素纯度标准物质进行加标回收试验，同时利用全麦粉粗蛋白质标准物质考察准确度。
5.数据处理试验 数据用spss数据分析软件进行单因素方差分析并进行duncan多重比较。
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2.氢氧化钠溶液(400 g/l) 称取4000 g氢氧化钠溶于水，冷却后稀释至10 l。
3.硼酸吸收溶液(含溴甲酚绿和甲基红指示剂)：
(1) 1%硼酸：将100 g硼酸溶于10 l纯水中。
(2) 0.1%溴甲酚绿溶液：0.1 g溴甲酚绿溶于100 ml95%乙醇中。
(3) 0.1%甲基红溶液：0.11 g甲基红溶液100 ml溶于 95%乙醇中。
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3.正交试验 根据单因素试验结果选取合理水平设计正交试验。
4.精密度及准确度试验 称取6个平行样品进行精密度试验，称取3个平行样品，加入尿素纯度标准物质进行加标回收试验，同时利用全麦粉粗蛋白质标准物质考察准确度。
5.数据处理试验 数据用spss数据分析软件进行单因素方差分析并进行duncan多重比较。
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