由于tse和其他动物病毒的存在,替代改用非动物源材料逐渐成为药厂的趋势。其中,植物源蛋白胨越来越得到广泛的应用。它作为营养成分,不仅可用于微生物的培养,而且可用于生产细胞无血清培养基的开发。
早在2004年,比利时的研究机构就发现,植物蛋白水解物支持cho-320细胞的增殖和重组干扰素的表达1。
他们在已开发的无蛋白成分的培养基基础上,添加一些植物蛋白水解物,发现整体培养基的性能即可达到含血清培养基的水平。研究人员发现,在添加了燕麦蛋白水解物的无蛋白培养基中,微载体悬浮cho-320细胞,细胞在生物反应器中分泌重组的干扰素γ提高了60%,大细胞密度升高了25%(和无添加其他成分的无蛋白成分培养基比较)。
在另一个小规模的灌流系统中,cho-320细胞在纤维微载体表面和内部培养,研究人员发现大米蛋白水解物能刺激重组ifn-r的分泌升高到30%(和对照组比较)。在生物反应器中也得到了相似的结果。但在摇瓶中培养时,微载体内存在着营养、氧气和毒性代谢产物浓度梯度的局限。但随着灌流速率的增加,葡萄糖浓度维持高于5.5mm,溶解氧为60%时,持续此状态培养160小时,即能刺激ifn-γ的生成水平达到6.6μg/h/g微载体,细胞密度达到4x108细胞/g微载体。
研究人员认为,植物蛋白胨可作为廉价的血清部分替代物,同时保证了生物安全性。该研究中同时公布了使用的无蛋白成分培养基的配方。5:5:1 (v:v:v) 比例混合iscove’s mdm, ham’s f12和nctc 135培养基,进一步添加*到6mm终浓度,以及32.5mm nahco3,60μm乙醇胺,从而构成了基础培养基(bdm)。
要悬浮培养cho细胞,bdm中进一步添加了0.1% pluronic f68,0.04pm ya硒suan钠和500μm的柠檬酸铁(铁和柠檬酸1:1),从而终构成了无蛋白成分培养基(pfs)。之后,即向pfs中添加了上述两种植物蛋白水解物。
作者认为,植物蛋白水解物刺激细胞生长和分泌,不单单是因为营养成分,很可能是因为其中多肽成分能和细胞表面的受体相互作用,从而发生效应。
himedia公司是的培养基生产商,在开发有一系列的植物蛋白水解产品(hiveg标识),这些植物蛋白来源包括玉米、豌豆、大豆、小麦、大米、燕麦、棉籽等。其中,细胞培养级的非动物源水解物有酵母粉、燕麦水解物、大豆蛋白胨、棉花水解物、乳清蛋白水解物(货号tc733)等,出厂前均经细胞培养测试,确保质量。
himedia公司具有who-gmp认证、iso9001,iso13485质量体系认证,以及产品的ce和fda注册登记。其产品已行销140多个。
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