PrimaCell™大鼠嗅鞘细胞试剂盒细胞培养方法
primacell™大鼠嗅鞘细胞试剂盒细胞培养方法；
1、细胞传代：细胞密度达到80-90%时即可传代
①弃去培养上清，用pbs或生理盐水清洗1-2次；
②加入2ml0.25%yi酶（t25瓶），使yi酶覆盖整个瓶或皿，盖好放入培养箱消化；
③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000rpm左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，t25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000rpm左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用pbs或生理盐水清洗1-2次，加入1ml 0.25%yi蛋白酶（t25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000rpm左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
子宫成纤维细胞
卵巢上皮细胞
卵巢成纤维细胞
卵巢微血管内皮细胞
乳腺上皮细胞
乳腺成纤维细胞
胰岛β细胞
甲状腺滤泡上皮细胞
淋巴内皮细胞
淋巴成纤维细胞
扁桃体上皮细胞
扁桃体成纤维细胞
颅盖造骨细胞
滑膜细胞
骨骼肌细胞
软骨细胞
破骨细胞
成骨细胞
脑膜细胞
神经元细胞
大脑皮层神经元
星形胶质细胞--中脑
海马神经元细胞
海马趾神经元
海马星形胶质细胞
小脑颗粒细胞
关键词：培养箱 显微镜
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③1-2min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；若细胞还是贴壁，放回培养箱继续消化至可以轻轻吹打下为止；
④将细胞悬液1000rpm左右条件下离心4min，弃上清；
⑤用新鲜培养基重悬后加入培养瓶或皿中，t25培养瓶加6-8ml培养基；
⑥悬浮细胞直接离心收集，细胞沉淀重悬后分到新培养瓶中。
2、细胞复苏：
①将冻存管在37℃温水中快速摇晃融化，时间1min左右，加入4-5ml培养基混匀。
②在1000rpm左右条件下离心4min，弃上清,加1-2ml培养基吹匀，将细胞悬液加入培养瓶中，补加适量培养基。
3、细胞冻存：待细胞生长状态良好时进行细胞冻存保种
①弃去培养上清，用pbs或生理盐水清洗1-2次，加入1ml 0.25%yi蛋白酶（t25瓶）
②1-2min后，显微镜下观察细胞，大部分细胞回缩且有少量细胞脱落，轻轻吹打下确认消化情况后加入*培养基终止消化；
③将细胞悬液1000rpm左右条件下离心4min，弃上清，加1ml冻存液重悬细胞；
④将冻存管放入程序降温盒，放入-80℃冰箱，4小时后将冻存管转入液氮罐储存。
子宫成纤维细胞
卵巢上皮细胞
卵巢成纤维细胞
卵巢微血管内皮细胞
乳腺上皮细胞
乳腺成纤维细胞
胰岛β细胞
甲状腺滤泡上皮细胞
淋巴内皮细胞
淋巴成纤维细胞
扁桃体上皮细胞
扁桃体成纤维细胞
颅盖造骨细胞
滑膜细胞
骨骼肌细胞
软骨细胞
破骨细胞
成骨细胞
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