尿素氮检测试剂盒测定原理
尿素氮是人体蛋白质代谢的主要终末产物。氨基酸脱氨基产生nh3和co2,两者在肝脏中合成尿素,每克蛋白质代谢产生尿素0.3g。尿素中氮含量为28/60,几乎达一半。通常肾脏为排泄尿素的主要器官,尿素从肾小球滤过后在各段小管均可重吸收,但肾小管内尿流速越快重吸收越少,也即达到了最大清除率。和血肌酐一样,在肾功能损害早期,血尿素氮可在正常范围。当肾小球滤过率下降到正常的50%以下时,血尿素氮的浓度才迅速升高。正常情况下,血尿素氮与肌酐之比(bun/scr)值约为10.1,高蛋白饮食、高分解代谢状态、缺水、肾缺血、血容量不足及某些急性肾小球肾炎,均可使比值增高,甚至可达20~30;而低蛋白饮食,肝疾病常使比值降低,此时可称为低氮质血症。
在加热和强酸条件下,尿素氮与二乙酰肟缩合成红色的联吖嗪称之fearon 反应。根据色泽的深浅可以计算出尿素氮的含量。
标本:
草酸盐、肝素或edta 抗凝的血浆。血浆中的尿素氮在室温下可稳定24 小时,而在4~6℃至少稳定7 天。尿液用生理盐水作1:10~1:50 稀释后与血浆操作相同。若超出线性范围,须再稀释。
注意事项:
1、酸溶液与肟溶液可按等量混匀,用量为2ml,但此混合液只能保存7 天左右。
2、比色前若发现沉淀,则可3500 转/分离心10 分钟。
3、颜色太深时,将样品作适当稀释,结果再乘以稀释倍数。
4、重度脂血标本要用除蛋白滤液测定。
5、试剂4℃保存,有效期一年。
6、本法可以在反应完后从反应液中吸取适量(200-300μl),加入到96 孔板中(注意不要引入气泡),酶标仪520nm下读数,吸光值代入公式计算。
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