HCT-15/5FU 人结直肠癌氟尿嘧啶耐药株
hct-15/5fu 人结直肠癌氟尿嘧啶耐药株
fluorouracil resistant strains of human colorectal cancer ,hct15/5fu
货号：yj-h073（str（hct15）鉴定）
价格： 2500.0
规格： 1*106细胞介绍
hct-15/fu为由hct-15细胞构建的耐5-fu药物细胞株。
细胞特性
1）来源：人结肠癌细胞耐药筛选
2）形态：上皮细胞样，贴壁生长
3）含量：>1×10^6细胞数
4）规格：t25瓶或者1ml冻存管包装
5）用途：仅供科研使用。
细胞运输、保存及注意事项
复苏细胞
冻存细胞
包装
充液的t25细胞培养瓶
1ml冻存管
运输条件
常温
干冰
保存方式
37℃恒温细胞培养箱
-80℃冰箱中保存过夜后转入液氮
或立即复苏
※注意事项
1.收到细胞后，若发现培养瓶破损、漏液及细胞有污染；或冻存管有破损，融化、漏液等，请立即拍照并联系我们。照片包括细胞培养瓶/冻存管外观，显微镜下细胞照片（100倍，200倍各2张）；
2.若收到的复苏细胞有少量细胞脱落、飘起，可能由于运输途中导致。请先于37℃恒温细胞培养箱中静置2~3h后，再进行处理；
3.复苏细胞的充液培养基为不含药物的维持培养基，血清浓度较低，收到细胞后请及时更换为完全培养基；
4.建议收到细胞后，首先进行扩增（至少3代），并冻存部分细胞以备用。
5.初次培养，当细胞汇合度达约80%时，可加入10~16ug/ml 5-fu的完全培养基培养至细胞完全融合后传代。细胞传代1~2次后仍能保持增殖，即可提高药物浓度至20ug/ml继续培养；若此过程中细胞停止增殖，且状态较差，则需降低药物浓度（首次降低一半药物浓度）或使用不含药物的完全培养基培养，至细胞汇合度达80%左右，且生长状态较好时，再更换为所需的5-fu药物浓度。
6.细胞冻存过程中，不可添加药物，且冻存液中不含药物。
细胞培养试剂的配制
1）5-fu药物的配制及保存
建议将5-fu药物配制成20mg/ml的母液，即使用1ml 1m的naoh溶液溶解20mg 5-fu药物，使其完全溶解。（若所购买的5-fu药物规格为10mg，则加入0.5ml 1m的naoh溶液，待其完全溶解即为20mg/ml母液）
注意：可根据用量配置药物，并将药物分装保存，避免反复冻融导致药物失效。溶解后的5-fu，4℃保存1周，-20℃保存1个月，-80℃保存6个月。
2）冻存液的配制
90%优质胎牛血清+10%dmso，现用现配。（冻存液中不含药物）
3）完全培养基的配制（推荐使用yj-h073-001b）
成分
体积/浓度
优质胎牛血清
10%
双抗
1%
20ug/ml 5-fu
0.1%母液（20mg/ml）
rpmi-1640培养基
补充至所需体积
细胞培养条件
气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%~80%。
细胞处理
1）冻存细胞的复苏
将含有1ml细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4~6ml完全培养基的离心管中混合均匀，1000rpm/min离心3~5min，弃去上清液。加入1ml完全培养基重悬细胞后，均匀铺于含6~8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中，置于37℃恒温细胞培养箱中过夜培养。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
注意：①细胞复苏过程中，不可使用含有药物的培养基。须在细胞生长至汇合度达80%左右时，方可添加10~16ug/ml 5-fu药物；若细胞生长状态较为缓慢，可适当降低5-fu的浓度（首次降低一半药物浓度），或使用不含5-fu的完全培养基培养至细胞生长状态较好时，再更换为所需的5-fu浓度。
②建议复苏细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩，避免冻存管处于温差较大情况下发生爆炸，造成人员伤害。
2）细胞传代（建议以同等底面积的培养瓶/皿按照1：2比例传代）
①待细胞密度达到80%~90%时，即可进行传代培养。
②弃去培养上清，用不含钙、镁离子的pbs润洗细胞1次，吸净残余的pbs。
③加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mm edta于培养瓶中（t25瓶1-2ml，t75瓶2-3ml），置于37℃培养箱中消化2~5min，显微镜下观察细胞细胞大部分变圆并脱落，即可轻拍培养瓶至细胞全部脱落。迅速拿回操作台，加入2倍体积的、含10%fbs的培养基中止消化。
④将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min离心5min，弃去上清液。
⑤向细胞沉淀中加入1~2ml完全培养基重悬细胞，轻吹混匀。将细胞悬液按1：1的比例均匀铺于2个新的培养瓶/皿中，添加6~8ml完全培养基。
注意：细胞传代1~2次后仍能保持增殖，即可提高药物浓度至20ug/ml继续培养；若此过程中细胞停止增殖，且状态较差，则需降低药物浓度（首次降低一半药物浓度）或使用不含药物的完全培养基培养，至细胞汇合度约80%，且生长状态较好时，再更换为所需的5-fu药物浓度。
3）细胞冻存
①细胞冻存时，步骤同2）细胞传代的①~④，细胞计数后，加入配制好的细胞冻存液，重悬细胞，按照1×10^6~ 1×107个细胞/ml分配到一个冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
注意：细胞冻存过程中，不可添加药物。
②将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80℃冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
注意事项
1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2.收到细胞先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时（视细胞密度而定）稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收细胞时就整体外观拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，随后在显微镜下拍下细胞状态，100*，200*各一张），观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。
3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响，故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态，故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明，期间间隔时间不能大于7天。
4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
5.客户在细胞培养过程中，有技术问题可以联系咨询技术售后，我们随时给予解答。
从2011年开始我们致力于在生命科学领域、生物医学实验外包及论文润色服务，协助客户各类实验服务及论文润色十多年，是您值得信赖的科研合作伙伴!
如果您受时间、试验条件等限制而无法完成您的课题研究，欢迎您与我们联系。
实验代做服务：
试剂盒免费代检测
石蜡冰冻切片tunel凋亡荧光
扫描电镜服务
实验室代做实验项目
透射电镜服务实验服务
石蜡/冰冻切片tunel凋亡
核仁组成区嗜银-agnor染色实验服务
细胞荧光染料标记检测实验
rna结合蛋白免疫沉淀（rip）实验代做
he染色
六胺银法染色实验服务
天狼猩红染色实验服务
网状纤维染色银染实验服务
染色质免疫沉淀分析(clip)实验服务
免疫组化ihc染色实验服务
油红o染色实验服务
atp/adp检测实验服务
蛋白双向(2-d)电泳实验服务
免疫共沉淀（co-ip）实验代做
免疫细胞化学icc实验服务
pkc活性检测实验
免疫共沉淀（chirp）实验
蛋白双向2d-wb电泳实验服务
端粒酶活性检测实验
探针合成实验服务
nf-kb p65活性检测实验
喹诺酮类快速检测试剂盒
鸡传染性法氏囊病病毒vp2抗体诊断试剂盒
胶原蛋白与胶原蛋白肽
果品检测仪器确保果品质量安全
液压制动器相关参数校核说明
散装颗粒分装机 立式自动计量装袋机的规格
使用测汞仪的注意事项
HCT-15/5FU 人结直肠癌氟尿嘧啶耐药株
不锈钢反应釜反应釜系统研制
放大器的作用和分类
铣削组合机床的操作注意事项有哪些？
SLKG-120-2撕裂开关工作原理
造纸厂污泥污水用高压风机
金相显微镜相关知识
卡尔费休试剂该如何配置和标定
B222100000494三一挖掘机机油滤芯厂家讲解更换周期
HQY-1气体恒压调节器的技术参数
郑州纸箱包装厂定制纸箱的优势
夏季来临 物联网时代电气火灾该如何预防与面对
电动蝶阀特点及应用场合
微波干燥设备在木板上的应用
微波炉不能加热什么？哪些东西不能放微波炉加热
fluorouracil resistant strains of human colorectal cancer ,hct15/5fu
货号：yj-h073（str（hct15）鉴定）
价格： 2500.0
规格： 1*106细胞介绍
hct-15/fu为由hct-15细胞构建的耐5-fu药物细胞株。
细胞特性
1）来源：人结肠癌细胞耐药筛选
2）形态：上皮细胞样，贴壁生长
3）含量：>1×10^6细胞数
4）规格：t25瓶或者1ml冻存管包装
5）用途：仅供科研使用。
细胞运输、保存及注意事项
复苏细胞
冻存细胞
包装
充液的t25细胞培养瓶
1ml冻存管
运输条件
常温
干冰
保存方式
37℃恒温细胞培养箱
-80℃冰箱中保存过夜后转入液氮
或立即复苏
※注意事项
1.收到细胞后，若发现培养瓶破损、漏液及细胞有污染；或冻存管有破损，融化、漏液等，请立即拍照并联系我们。照片包括细胞培养瓶/冻存管外观，显微镜下细胞照片（100倍，200倍各2张）；
2.若收到的复苏细胞有少量细胞脱落、飘起，可能由于运输途中导致。请先于37℃恒温细胞培养箱中静置2~3h后，再进行处理；
3.复苏细胞的充液培养基为不含药物的维持培养基，血清浓度较低，收到细胞后请及时更换为完全培养基；
4.建议收到细胞后，首先进行扩增（至少3代），并冻存部分细胞以备用。
5.初次培养，当细胞汇合度达约80%时，可加入10~16ug/ml 5-fu的完全培养基培养至细胞完全融合后传代。细胞传代1~2次后仍能保持增殖，即可提高药物浓度至20ug/ml继续培养；若此过程中细胞停止增殖，且状态较差，则需降低药物浓度（首次降低一半药物浓度）或使用不含药物的完全培养基培养，至细胞汇合度达80%左右，且生长状态较好时，再更换为所需的5-fu药物浓度。
6.细胞冻存过程中，不可添加药物，且冻存液中不含药物。
细胞培养试剂的配制
1）5-fu药物的配制及保存
建议将5-fu药物配制成20mg/ml的母液，即使用1ml 1m的naoh溶液溶解20mg 5-fu药物，使其完全溶解。（若所购买的5-fu药物规格为10mg，则加入0.5ml 1m的naoh溶液，待其完全溶解即为20mg/ml母液）
注意：可根据用量配置药物，并将药物分装保存，避免反复冻融导致药物失效。溶解后的5-fu，4℃保存1周，-20℃保存1个月，-80℃保存6个月。
2）冻存液的配制
90%优质胎牛血清+10%dmso，现用现配。（冻存液中不含药物）
3）完全培养基的配制（推荐使用yj-h073-001b）
成分
体积/浓度
优质胎牛血清
10%
双抗
1%
20ug/ml 5-fu
0.1%母液（20mg/ml）
rpmi-1640培养基
补充至所需体积
细胞培养条件
气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%~80%。
细胞处理
1）冻存细胞的复苏
将含有1ml细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入到含4~6ml完全培养基的离心管中混合均匀，1000rpm/min离心3~5min，弃去上清液。加入1ml完全培养基重悬细胞后，均匀铺于含6~8ml完全培养基的培养瓶（或皿）中，置于37℃恒温细胞培养箱中过夜培养。第二天显微镜下观察细胞生长情况和细胞密度。
注意：①细胞复苏过程中，不可使用含有药物的培养基。须在细胞生长至汇合度达80%左右时，方可添加10~16ug/ml 5-fu药物；若细胞生长状态较为缓慢，可适当降低5-fu的浓度（首次降低一半药物浓度），或使用不含5-fu的完全培养基培养至细胞生长状态较好时，再更换为所需的5-fu浓度。
②建议复苏细胞时始终使用防护手套、衣服和戴上防护面罩，避免冻存管处于温差较大情况下发生爆炸，造成人员伤害。
2）细胞传代（建议以同等底面积的培养瓶/皿按照1：2比例传代）
①待细胞密度达到80%~90%时，即可进行传代培养。
②弃去培养上清，用不含钙、镁离子的pbs润洗细胞1次，吸净残余的pbs。
③加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mm edta于培养瓶中（t25瓶1-2ml，t75瓶2-3ml），置于37℃培养箱中消化2~5min，显微镜下观察细胞细胞大部分变圆并脱落，即可轻拍培养瓶至细胞全部脱落。迅速拿回操作台，加入2倍体积的、含10%fbs的培养基中止消化。
④将细胞悬液移入离心管中，1000rpm/min离心5min，弃去上清液。
⑤向细胞沉淀中加入1~2ml完全培养基重悬细胞，轻吹混匀。将细胞悬液按1：1的比例均匀铺于2个新的培养瓶/皿中，添加6~8ml完全培养基。
注意：细胞传代1~2次后仍能保持增殖，即可提高药物浓度至20ug/ml继续培养；若此过程中细胞停止增殖，且状态较差，则需降低药物浓度（首次降低一半药物浓度）或使用不含药物的完全培养基培养，至细胞汇合度约80%，且生长状态较好时，再更换为所需的5-fu药物浓度。
3）细胞冻存
①细胞冻存时，步骤同2）细胞传代的①~④，细胞计数后，加入配制好的细胞冻存液，重悬细胞，按照1×10^6~ 1×107个细胞/ml分配到一个冻存管中，标注好名称、代数、日期等信息。
注意：细胞冻存过程中，不可添加药物。
②将要冻存的细胞置于程序降温盒中，-80℃冰箱中过夜，之后转入液氮容器中储存。同时记录好冻存管在液氮容器中的位置以便后续查阅和使用。
注意事项
1.收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2.收到细胞先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置2-4小时（视细胞密度而定）稳定细胞状态。接着在倒置显微镜下观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收细胞时就整体外观拍一张照片，观察培养基的颜色和是否有漏液情况，随后在显微镜下拍下细胞状态，100*，200*各一张），观察记录细胞在运输过程中是否有污染情况。作为我方进行销售依据。
3.由于细胞状态受环境、操作和运输等多方面因素影响，故本公司只保证客户收到细胞后一周内的细胞状态，故客户需要售后时需出示收到细胞的时间证明及客户提供收货时间和发现问题后客服人员沟通的时间证明，期间间隔时间不能大于7天。
4.所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
5.客户在细胞培养过程中，有技术问题可以联系咨询技术售后，我们随时给予解答。
从2011年开始我们致力于在生命科学领域、生物医学实验外包及论文润色服务，协助客户各类实验服务及论文润色十多年，是您值得信赖的科研合作伙伴!
如果您受时间、试验条件等限制而无法完成您的课题研究，欢迎您与我们联系。
实验代做服务：
试剂盒免费代检测
石蜡冰冻切片tunel凋亡荧光
扫描电镜服务
实验室代做实验项目
透射电镜服务实验服务
石蜡/冰冻切片tunel凋亡
核仁组成区嗜银-agnor染色实验服务
细胞荧光染料标记检测实验
rna结合蛋白免疫沉淀（rip）实验代做
he染色
六胺银法染色实验服务
天狼猩红染色实验服务
网状纤维染色银染实验服务
染色质免疫沉淀分析(clip)实验服务
免疫组化ihc染色实验服务
油红o染色实验服务
atp/adp检测实验服务
蛋白双向(2-d)电泳实验服务
免疫共沉淀（co-ip）实验代做
免疫细胞化学icc实验服务
pkc活性检测实验
免疫共沉淀（chirp）实验
蛋白双向2d-wb电泳实验服务
端粒酶活性检测实验
探针合成实验服务
nf-kb p65活性检测实验
喹诺酮类快速检测试剂盒
鸡传染性法氏囊病病毒vp2抗体诊断试剂盒
胶原蛋白与胶原蛋白肽
果品检测仪器确保果品质量安全
液压制动器相关参数校核说明
散装颗粒分装机 立式自动计量装袋机的规格
使用测汞仪的注意事项
HCT-15/5FU 人结直肠癌氟尿嘧啶耐药株
不锈钢反应釜反应釜系统研制
放大器的作用和分类
铣削组合机床的操作注意事项有哪些？
SLKG-120-2撕裂开关工作原理
造纸厂污泥污水用高压风机
金相显微镜相关知识
卡尔费休试剂该如何配置和标定
B222100000494三一挖掘机机油滤芯厂家讲解更换周期
HQY-1气体恒压调节器的技术参数
郑州纸箱包装厂定制纸箱的优势
夏季来临 物联网时代电气火灾该如何预防与面对
电动蝶阀特点及应用场合
微波干燥设备在木板上的应用
微波炉不能加热什么？哪些东西不能放微波炉加热