有没有批量提取DNA的简便方法？
求大批量提取dna的简便方法，最近实验室要对转基因的材料进行pcr检测，估计要提取数以千计的水稻叶片dna。实验室一直用ctab法。因为只用于pcr检测，dna的量和质量要求都不高，请问各位同学有没有简便快捷的提dna方法？
pcr的时候误加了pbs有影响吗？
提供一个方法，我最近一直用这个方法提取拟南芥dna用于pcr，效果很好，方便快捷。见文献
a simple and rapid method for the preparation of plant genomic dna for pcr analysis
k.edwards, c.johnstone and c.thompson
nucleic acids research, vol. 19, no. 6 1349
实验室提拟南芥dna，edards溶液简易法用机器震荡完成，如果熟练加努力，一个人一天能提好几百个。
液氮提取啊，收率很高的，而且方便
应该是edwards,另外可以用叶片组织直接pcr的，可以自己摸索，也可以向公司购买。
我是小白来学习下~写写楼上的帮助
上面这位师兄的这篇文献所叙述的方法被广泛应用中，实际操作过程中，个人不建议在提取液中加入ctab，那样可能会导致dna扩增不出来，具体什么原理，暂时也还么有搞懂，但实践证明不加ctab，提取的水稻dna效果很好。并且耗时很短。几千个的话，快的话几天就搞定了。。
请问能说说你的详细步骤吗？是不是和文献上的一样：
用离心管切下叶片，然后用一次性的研磨棒磨碎，加入提取液，漩涡混匀5 s，室温静致1小时。13000 rpm离心1 min，取上清加入适量异丙醇沉淀核酸，13000 rpm离心5 min，干燥沉淀加水溶解。
这两周我在做race，导师单人匹马用传统的ctab法把几千个样都搞掂了....不过再过几个月又要检测晚造的植株了，还是想要试一试简便的方法。
你们导师是一位很强悍的人啊，这点上，让人佩服，作为学生的我们实在是感到汗颜。
上面那位前辈的文献我看了，其实有些步骤是不一样的，比如说我们添加了一步酒精清洗dna，这样的dna比不清洗的肯定要好。
但是师兄不知道你提这个dna干什么用的，有点必须说清楚，sds法提取的是微量dna，如果是做定位什么的，这个方法还是稍显欠缺的。传统ctab法自然是有它的道理。
那么下面就说说一般我们是怎么做的吧。
首先磨碎加入提取液混匀，我们甚至没有用到漩涡震荡仪，静置一段时间，具体我还真没怎么记是多久，反正一个小时以内了，然后12000离心2min，吸取上清，加入异丙醇沉淀，静置两分钟，适量混匀。12000离心5min，去除上清，加入75%酒精清洗，离心5min，去酒精，干燥沉淀，加入ddh2o溶解。
我就是核酸提取后，pcr多态性扩增不出条带（白板），是什么原因呢？用的引物是issr，材料是果树类莲雾叶片，体系没有问题，是让别人一块的带着混样的，模板量是母液稀释30倍后加2微升，提取步骤：ctab法，酚-氯仿-异戊醇抽提10min,氯仿-异戊醇抽提10min, 异丙醇沉淀，te溶解，rna酶处理，氯仿-异戊醇抽提10min, 异丙醇沉淀；dd水溶解===这种情况是年后才出现的，以前的时候没有问题，已经提取了好多次了，有的时候是刚提取后 就扩增条带很好，然后不到一周就又不行了，搞不明白啊~~
十分感谢。我们提dna只是为筛选转基因的水稻植株，dna的质量要求不高。
另再问，你是用液氮磨碎样品的吗？用的提取液应该是和文献的一样的吧：200 mm tris hcl ph 7.5, 250 mm nacl, 25 mm edta, 0.5% sds。
同学你的dna质量如何呢？譬如说扩actin之类的正对照能扩出来么？
正对照是怎么跑的呢？dna质量个人认为还行吧，方法是实验室传统方法，以前都没问题，一直在找原因，头都大了~·
师兄啊我倒是想帮你分析呀，但是我没有实际用ctab操作过，都是理论上的知识，现在也就开始做实验顶天三个月，积淀还差的远，有心无力。
个人觉得吧实际做实验的时候什么情况都能出现。还真说不出来个所以然。有几次我更纠结呢，一个indel引物次p出来了，后面四次一次都没有p出来。模板，引物，pcr条件都试过了，这个到现在都不知道什么原因。
你说有时候刚提取出来的扩增条带很好，不到一周就不行了，是不是dna被降解了？一般来说dan放在4度冰箱是可以保存两个月的。一般溶解dna喜欢用tris ph 8.0 10mm。要不然师兄你试试吧。。。
水稻的话是要而且动作一定要快，液氮的，不然叶片咋个弄的碎哟，提取液用1.5%sds吧。感觉0.5%的话，稍微有点低。
请问一下师姐，要取多少的样呢？可否用液氮磨碎后，再转移到ep管，再加提取液？
首先答案是肯定的，这样子弄可以的撒。
但是为什么要这样做呢？
在液氮磨碎后转移到ep管？你们用研钵磨碎的吗？
还是说你们的样本很难于磨碎，必须使用这样的方式才能磨碎。
一般来说禾本科类的植物取样本的量如水稻只需要3~5分之一叶片就足够了，当然这个也是要根据你做的实验的要求来的。
个人觉得如果做水稻这类禾本科植物的话不需要这么麻烦，这样既浪费液氮，样本的取样量要求也必较大，中间肯定有损失的撒。其他比如木本植物什么的话，可以试试
一般都是酚-氯仿抽提法
我提拟南芥用的！要求不高，pcr就好！
这个提出来，黑乎乎的一坨！明显的不是dna啊！（edtana2 代替了edta)
话说我也是做拟南芥的哇
用这个方法简单方便，很快的
至于为什么会黑乎乎一坨我还真没遇到过？关键是你还用的是坨？
难道不是液体？你提出来是固态？？？？？
不好意思上面这个说法有问题哈，按理来说溶解后的dna应该是无色的吧？
用异丙醇沉淀后，去上清，就是黑乎乎的了！目测是蛋白，加70%乙醇洗2次~ddh2o溶不了！
这个要怎么说好呢
sds这个方法大家运用的都已经很熟悉了
禾本科类的植物用这个方法都很快捷简单
现在来回答生理生态学的这位虫友哈，因为没有名字只能这么称呼了
至于我怎么提取的，具体方法请参照前面回帖，这里就不再说了
提取液的配方请参照前面的用量，次吸取的上清液应该是无色或者绿色的。说是无色的是因为如果你取样特别微量（拟南芥播种后大约20天左右的苗去其叶片）的话，可能是看不到什么东西的，但dna是能提出来的。
如果这步么有问题，那么加入异丙醇沉淀，在管底可能会看到白色的沉淀物的。为啥我又要说可能呢？是因为拟南芥这个东西基因组本来就小，样本再一小，提取出来的量就可能肉眼不见咯。
如果是水稻的话，可以看到很明显的白色沉淀哈~~
如果这样子还在黑乎乎的话，就不知道怎么回事了。。。
只能说求人品。。。。
我们有植物直接pcr试剂盒，无需单独提取dna,快速、灵敏、特异性强，适用于植物样品的高通量筛选和检测。qq：
请问你在析出dna那一步，加入-20度无水乙醇后放在-20度冰箱中多久啊。放久了会不会对dna有影响啊。
水稻直接丁丁点叶片，想办法捣烂巴点，加naoh95度煮煮数分钟，加点酸中和，上清液就可以去做pcr了
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液氮提取啊，收率很高的，而且方便
应该是edwards,另外可以用叶片组织直接pcr的，可以自己摸索，也可以向公司购买。
我是小白来学习下~写写楼上的帮助
上面这位师兄的这篇文献所叙述的方法被广泛应用中，实际操作过程中，个人不建议在提取液中加入ctab，那样可能会导致dna扩增不出来，具体什么原理，暂时也还么有搞懂，但实践证明不加ctab，提取的水稻dna效果很好。并且耗时很短。几千个的话，快的话几天就搞定了。。
请问能说说你的详细步骤吗？是不是和文献上的一样：
用离心管切下叶片，然后用一次性的研磨棒磨碎，加入提取液，漩涡混匀5 s，室温静致1小时。13000 rpm离心1 min，取上清加入适量异丙醇沉淀核酸，13000 rpm离心5 min，干燥沉淀加水溶解。
这两周我在做race，导师单人匹马用传统的ctab法把几千个样都搞掂了....不过再过几个月又要检测晚造的植株了，还是想要试一试简便的方法。
你们导师是一位很强悍的人啊，这点上，让人佩服，作为学生的我们实在是感到汗颜。
上面那位前辈的文献我看了，其实有些步骤是不一样的，比如说我们添加了一步酒精清洗dna，这样的dna比不清洗的肯定要好。
但是师兄不知道你提这个dna干什么用的，有点必须说清楚，sds法提取的是微量dna，如果是做定位什么的，这个方法还是稍显欠缺的。传统ctab法自然是有它的道理。
那么下面就说说一般我们是怎么做的吧。
首先磨碎加入提取液混匀，我们甚至没有用到漩涡震荡仪，静置一段时间，具体我还真没怎么记是多久，反正一个小时以内了，然后12000离心2min，吸取上清，加入异丙醇沉淀，静置两分钟，适量混匀。12000离心5min，去除上清，加入75%酒精清洗，离心5min，去酒精，干燥沉淀，加入ddh2o溶解。
我就是核酸提取后，pcr多态性扩增不出条带（白板），是什么原因呢？用的引物是issr，材料是果树类莲雾叶片，体系没有问题，是让别人一块的带着混样的，模板量是母液稀释30倍后加2微升，提取步骤：ctab法，酚-氯仿-异戊醇抽提10min,氯仿-异戊醇抽提10min, 异丙醇沉淀，te溶解，rna酶处理，氯仿-异戊醇抽提10min, 异丙醇沉淀；dd水溶解===这种情况是年后才出现的，以前的时候没有问题，已经提取了好多次了，有的时候是刚提取后 就扩增条带很好，然后不到一周就又不行了，搞不明白啊~~
十分感谢。我们提dna只是为筛选转基因的水稻植株，dna的质量要求不高。
另再问，你是用液氮磨碎样品的吗？用的提取液应该是和文献的一样的吧：200 mm tris hcl ph 7.5, 250 mm nacl, 25 mm edta, 0.5% sds。
同学你的dna质量如何呢？譬如说扩actin之类的正对照能扩出来么？
正对照是怎么跑的呢？dna质量个人认为还行吧，方法是实验室传统方法，以前都没问题，一直在找原因，头都大了~·
师兄啊我倒是想帮你分析呀，但是我没有实际用ctab操作过，都是理论上的知识，现在也就开始做实验顶天三个月，积淀还差的远，有心无力。
个人觉得吧实际做实验的时候什么情况都能出现。还真说不出来个所以然。有几次我更纠结呢，一个indel引物次p出来了，后面四次一次都没有p出来。模板，引物，pcr条件都试过了，这个到现在都不知道什么原因。
你说有时候刚提取出来的扩增条带很好，不到一周就不行了，是不是dna被降解了？一般来说dan放在4度冰箱是可以保存两个月的。一般溶解dna喜欢用tris ph 8.0 10mm。要不然师兄你试试吧。。。
水稻的话是要而且动作一定要快，液氮的，不然叶片咋个弄的碎哟，提取液用1.5%sds吧。感觉0.5%的话，稍微有点低。
请问一下师姐，要取多少的样呢？可否用液氮磨碎后，再转移到ep管，再加提取液？
首先答案是肯定的，这样子弄可以的撒。
但是为什么要这样做呢？
在液氮磨碎后转移到ep管？你们用研钵磨碎的吗？
还是说你们的样本很难于磨碎，必须使用这样的方式才能磨碎。
一般来说禾本科类的植物取样本的量如水稻只需要3~5分之一叶片就足够了，当然这个也是要根据你做的实验的要求来的。
个人觉得如果做水稻这类禾本科植物的话不需要这么麻烦，这样既浪费液氮，样本的取样量要求也必较大，中间肯定有损失的撒。其他比如木本植物什么的话，可以试试
一般都是酚-氯仿抽提法
我提拟南芥用的！要求不高，pcr就好！
这个提出来，黑乎乎的一坨！明显的不是dna啊！（edtana2 代替了edta)
话说我也是做拟南芥的哇
用这个方法简单方便，很快的
至于为什么会黑乎乎一坨我还真没遇到过？关键是你还用的是坨？
难道不是液体？你提出来是固态？？？？？
不好意思上面这个说法有问题哈，按理来说溶解后的dna应该是无色的吧？
用异丙醇沉淀后，去上清，就是黑乎乎的了！目测是蛋白，加70%乙醇洗2次~ddh2o溶不了！
这个要怎么说好呢
sds这个方法大家运用的都已经很熟悉了
禾本科类的植物用这个方法都很快捷简单
现在来回答生理生态学的这位虫友哈，因为没有名字只能这么称呼了
至于我怎么提取的，具体方法请参照前面回帖，这里就不再说了
提取液的配方请参照前面的用量，次吸取的上清液应该是无色或者绿色的。说是无色的是因为如果你取样特别微量（拟南芥播种后大约20天左右的苗去其叶片）的话，可能是看不到什么东西的，但dna是能提出来的。
如果这步么有问题，那么加入异丙醇沉淀，在管底可能会看到白色的沉淀物的。为啥我又要说可能呢？是因为拟南芥这个东西基因组本来就小，样本再一小，提取出来的量就可能肉眼不见咯。
如果是水稻的话，可以看到很明显的白色沉淀哈~~
如果这样子还在黑乎乎的话，就不知道怎么回事了。。。
只能说求人品。。。。
我们有植物直接pcr试剂盒，无需单独提取dna,快速、灵敏、特异性强，适用于植物样品的高通量筛选和检测。qq：
请问你在析出dna那一步，加入-20度无水乙醇后放在-20度冰箱中多久啊。放久了会不会对dna有影响啊。
水稻直接丁丁点叶片，想办法捣烂巴点，加naoh95度煮煮数分钟，加点酸中和，上清液就可以去做pcr了
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