小鼠杂交瘤细胞特性与操作步骤
细胞特性:
1)细胞来源于人胎盘组织。
2)细胞鉴定：血小板-内皮细胞粘附分子（pecam-1/cd31）或血管假性血友病因子（vwf）免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有hiv-1、hbv、hcv、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式：上皮样，多角形细胞，贴壁培养。
操作步骤：
1）贴壁细胞传代：提前将培养基、pbs放入37℃水浴锅内预热，用75%酒精擦拭后再放入超净台内，吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液，加少量pbs润洗细胞，加入适量，使的量能盖住细胞，37℃孵育，每隔2~3min显微镜下观察，待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去，加入新鲜培养基，晃动细胞瓶，终止作用，用吸管小心吹打贴壁的细胞，制成细胞悬液。控制吹打的力度，避免产生大量的气泡，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养，隔天观察贴壁生长情况。
2）悬浮细胞传代：将细胞悬液转移到无菌离心管内，1000rpm离心5min，弃去上清，加入新鲜的培养基，用吸管小心吹散沉淀，制成细胞悬液，将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内，加入新鲜培养基，置37℃温箱培养。
关键词：水浴锅 显微镜
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