液相色谱仪的工作流程

液相色谱仪是实验室常见的仪器,在使用它时,一定要注意先后顺序。
(1) 0~2小时 配制流动相、对照品和供试品溶液等,切勿催促昨日试验同事。
(2) 2~3小时 采用a管路注入流动相(b、c、d管路一般不用,除非梯度洗脱才用到b管路),平衡1小时。如流动相中有表面活性剂,建议前一晚小流速过夜,第二天上班后将流速增至1.0ml/min,平衡1小时后即可开始做试验。
(3) 3~5小时 测定空白溶剂,一定要做到基线不漂移后方可开始测定。所谓“不漂移”,通常系指以1.0%自身对照溶液主成分峰高约20%高度来设定的视野范围观察所得,切不可设定得过小,使得杂质峰显得很突兀、基线抖动得很厉害,弄得人很担心。
(4)液相色谱仪5~8小时 配制完所有样品,预试了对照溶液和供试品溶液,设定好自动进样程序,程序最后一针设定为小流速过夜,紫外灯关闭。切勿设定为切换至b管路洗脱,此举得不偿失。
(5) 9~24小时 放心回家,让仪器自动进样,除非不稳定的样品(配制一份测定一针)。充分利用下班后的16小时,做到从容不迫、镇定自若。如单位还无自动进样装置,建议向领导申请购买,因一台自动媲美三台手动。
(6)第二天0~0.5小时 检查并计算昨晚试验结果,如发现不良记录,将流速增至1.0ml/min,平衡30分钟后,测定重新配制的该份样品即可(同时回校对照一针)。无需全部重新测定,不要过度谨小慎微。
(7)液相色谱仪第二天0.5~2.0小时 如上冲洗色谱柱,交给其后试验同事。

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