液相色谱仪使用种的长常见故障处理
1、气泡溢出:流动相内有气泡,关闭泵并打开泄压阀清洗脱气,气泡从过滤器冒出进入流动相,无论打开purge键几次,都无法清除不断产生的气泡。原因可能是过滤器长期沉浸于乙酸铵等缓冲液内,霉菌生长繁殖形成菌团,阻塞了过滤器,缓冲液难以流畅地通过过滤器,空气在泵的压力作用下经过滤器进入流动相。
处理过滤器浸泡于5%硝酸溶液中,超声清洗几分钟即可;或将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中12~36小时,轻轻震荡几次,再用纯水清洗几次,打开泄压阀清洗脱气,如仍有气泡不断冒出,继续将过滤器浸泡于5%硝酸溶液中。
2、柱压高
(1)缓冲液盐分如沉积于柱内:先用40~50℃的纯水低速正向冲洗柱子,待柱压逐渐下降后提高流速冲洗,大幅度下降后常温冲洗,之后用纯甲醇冲洗柱子30分钟。
(2)样品污染沉积:样品的沉积引起污染的c18柱,和纯水反向冲洗柱子,换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子,再换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,末尾甲醇冲洗正向冲洗柱子30分钟以上。
3、无指示
(1)泵密封垫圈磨损:更换密封垫圈
(2)大量气泡进入泵体:在泵作用时用一个50ml的玻璃针筒在泵的出口处抽出空气。
4、不稳定
原因可能是系统中有空气或者单向阀的宝石球和阀座之间有异物,使两者不能密封。处理工作中注意观察流动相的量,保证不锈钢滤器沉入储液器瓶底,避免吸入空气,流动相要充分脱气。如为单向阀和阀座之间夹有异物,拆下单向阀,放入盛有丙酮的烧杯用超声波清洗。
5、峰分叉
(1)色谱柱被污染:用纯水反向冲洗柱子,然后换成甲醇冲洗,接着用甲醇+异丙醇(4+6)冲洗柱子后换成甲醇冲洗,然后用纯水冲洗,用甲醇正向冲洗柱子30分钟以上。
(2)柱头填料塌陷:拧开柱头,检查柱填料是否硬结或塌陷。去除硬结部分(污染的填料),装入新填料,滴一滴甲醇,填料下陷,再填,用与柱内径相同的顶端平滑的不锈钢杆压紧,再填平,滴甲醇,再压紧反复几次,直至装满填平。柱头用甲醇冲洗干净,擦净柱外壁的填料,拧紧柱头,用纯甲醇冲洗30分钟以上。
6、重复性差
(1)进样阀漏液:更换进样阀垫圈。
(2)加样针不到位:保证加样针插到底,注射样品溶液须快速平稳以保证准确进样。
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