支原体是目前为止发现的最小的原核生物,支原体污染一般在显微镜下不可见,很难察觉,但细胞会受到极大的损伤,主要通过以下途径影响细胞生长及功能。那么细胞被支原体污染,该怎么办呢?让我们一起来看看吧!
一、支原体污染的来源
1. 环境污染:如细胞培养房、细胞培养箱、超净工作台内已被支原体污染;
2. 实验器材的污染:移液枪、移液管、细胞培养皿、水浴锅等;
3. 细胞培养试剂的污染:培养基、胰酶、血清、细胞冻存液等;
二、处理方法
1. 及时更换培养液:可以减缓支原体的污染,但不能wan全清除;
2. 使用抗生素类去除试剂:抗生素对支原体有较好的抑制作用,可以有效清除支原体,但长时间使用抗生素,会产生耐药性的风险。在使用单一抗生素清除效果不佳时,可以考虑更换抗生素或者采用复合型抗生素试剂;
3. 使用非抗生素去除试剂:非抗生素清除试剂不会产生耐药性,对支原体的清除效果可以达到100%,且几乎对细胞没有影响,是去除支原体的shou选试剂。
4. 实验室环境清洁:发生支原体污染后,应及时处理已被污染的细胞,并对细胞房进行che底的清洁和消杀,防止交叉污染。
三、预防方法
1. 定期消毒:定期对细胞房、实验服、移液枪、细胞培养箱等进行消毒,及时清除支原体;
2. 检查细胞培养试剂:选择来源可靠的试剂及耗材产品,在进行细胞培养操作之前,检查细胞培养基、血清、胰酶等试剂,可选择合适孔径的滤膜进行过滤除菌,使用过程中如发现有污染应及时更换;
3. 规范细胞培养操作:建立良好的细胞培养操作sop,遵循无菌操作原则,规范穿戴实验服、口罩、手套等,并在细胞培养开始时进行消毒;规范处理实验废弃物;
4. 在培养基中加入支原体预防试剂:
加入抑制支原体dna合成的抗生素:例如氟喹诺酮类抗生素;
加入抑制支原体蛋白质合成的抗生素:例如大环内酯类、四环素、双萜烯类等抗生素;
加入非抗生素类支原体清除试剂:如膜活性多肽,通过与支原体膜特异性结合che底清除支原体。
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