高效液相色谱仪(high performance liquid chromatography,hplc)是一种广泛应用于各个领域的分析技术,其工作原理是基于样品在固定载体上的分离和纯化。hplc采用了流动相和固定相相互作用的分离机制,能够将样品中不同成分隔离开来。其中,固定相主要分为分子筛、spe固相萃取柱、反相柱、正相柱、离子交换柱等类型。流动相则通常为有机溶剂、水或缓冲液等。
高效液相色谱仪的样品混合物被喷入固定相上的柱子中,随着流动相的不断流动,样品混合物逐渐被固定相表面吸附或溶解,并不断与固定相交换。而不同成分的吸附和溶解速度也不同,这样不同成分在流动相的推动下,就会分离开来,依次出现在柱床传感器处,形成各自的峰。峰的高度和面积反映了样品中各组分的相对含量和纯度。hplc可以采取吸附谱和反射谱两种方式进行检测。
使用环境的要求:
1.安全性:高效液相色谱仪使用有机溶剂和流动相,这种液体在使用和操作过程中燃烧性、挥发性都很强,特别容易引发火灾或爆炸。因此,必须在安全通风的实验室环境下操作,避免点火、电气火灾等危险。
2.稳定性:涉及到流动相的压力控制、流量控制、柱温控制等多种参数,使用环境需要稳定性高,电力和水逻辑稳定、温度控制恒定等。
3.净化度:工作所需的样品纯度通常要求高,和其他较为复杂的分析仪器相比,取样、试剂、仪器本身需要保持一定的净化度。
4.系统兼容性:不同的hplc类型、不同的柱子、流动相和探测器等均存在系统兼容性问题。因此使用方在选择配套设备时需要注意设备兼容性。
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