两种粒径免疫比浊微球提高灵敏度和线性范围的原理

免疫比浊法是一种基于抗原-抗体特异性结合反应的定量免疫分析方法。将待测抗原样品与其对应的抗体在适当条件下混合反应,抗原与抗体结合形成沉淀,使反应溶液浊度增加,通过测定溶液浊度的变化来定量分析抗原。使用两种不同粒径的免疫比浊微球联合用于免疫比浊技术,通过优化各实验条件可以有效提高方法的灵敏度、准确度和线性范围。在研发联用两种微球的免疫比浊方法时,需要考虑不同微球在性质、修饰和免疫反应条件上的差异,选择最佳的条件使两种微球发挥最大的优势,同时也要防止两种微球在检测中的相互影响。
产品参数:
粒径 基团 均一性(c.v%) 固含量 1ml
70nm cooh 3% 10.0% 90.00
80nm cooh 3% 10.0% 90.00
100nm cooh 3% 10.0% 90.00
105nm cooh 3% 10.0% 90.00
120nm cooh 3% 10.0% 90.00
130nm cooh 3% 10.0% 90.00
150nm cooh 3% 10.0% 90.00
170nm cooh 3% 10.0% 90.00
190nm cooh 3% 10.0% 90.00
195nm cooh 3% 10.0% 90.00
200nm cooh 3% 10.0% 90.00
240nm cooh 3% 10.0% 90.00
可给工业客户赠送样品,提供10ml/100ml/1l/5l/10l等大规格,欢迎咨询。
产品特点:
羧基分布更加均匀,羧基手臂链更长
微球表面极度亲水,大大降低非特异吸附
彻(空格)底免清洗,可拿来超声后直接偶联
批生产能力100l,性能稳定,批间差小,有效期可达5年以上
可接受客户定制和项目外包合作,帮助企业实现原料自主化
更高的灵敏度和更宽的线性范围
可提供整体解决方案
产品参数:
材质:聚苯乙烯
尺寸:50nm-500nm
折射率:1.59(589nm波长,25℃)
密度:1.05g/cm3
分散介质:纯水(含有少量表面活性剂和防腐剂)
基团密度:50-286μeq/g(可定制)
储存条件:2-30℃ 保存,切勿冻融
免疫比浊法灵敏度和线性范围主要受以下几个因素的影响
1. 抗原浓度
抗原的种类和浓度直接决定了比浊反应的强度,抗原浓度越高,反应强度越大,检测灵敏度越高。但过高的抗原浓度也会导致检测系统饱和,失去线性关系。
2. 抗体浓度
一定浓度范围内,抗体浓度越高,与抗原的结合机会越多,沉淀强度越大,检测灵敏度越高。但过量的抗体也会产生抗体自身聚合的非特异反应,影响线性范围。
3. 抗体亲和力
亲和力越高的抗体,与抗原的结合程度越强,产生的比浊信号也越强,检测灵敏度越高。高亲和力抗体也常用于提高检测线性范围。
4. 抗体种类
单克隆抗体与多克隆抗体相比,其与抗原的特异性结合更强,产生的比浊信号更大,检测灵敏度更高。但线性范围较小。聚缺口抗体可提高线性范围。
5. 试剂稀释倍数
在一定范围内,试剂倍数越高,反应物浓度越大,检测灵敏度越高。但过高会超出线性范围,产生 hook 效应。
6. 反应时间
适当延长反应时间,有利于抗原与抗体之间的结合,增强比浊信号,提高检测灵敏度。但过长时间也会超出线性范围。
7. 反应温度
在一定范围内,温度升高有利于抗原与抗体结合,提高检测灵敏度。但过高温度会使酶或荧光标记物不稳定,缩小线性范围。
两种不同粒径免疫比浊微球有效提高灵敏度和线性范围的技术原理
1. 不同粒径的微球具有不同的比表面积,小粒径微球的比表面积更大,有利于生物识别分子的吸附或偶联,可以提高微球与目标分析物的结合效率,从而提高方法的灵敏度。
2. 不同粒径微球阻碍光线通过的程度不同,小粒径微球对光线的阻碍更小,有利于在低浓度下产生可检测的吸光度变化,有利于提高检出限和下限。
3. 不同粒径微球在免疫反应中的沉降速率不同,小粒径微球的沉降速率更慢,有利于免疫反应的进行,获得更高的结合效率,提高灵敏度。
4. 不同粒径微球可与不同浓度范围的目标分析物产生最佳的免疫反应,小粒径微球与低浓度分析物,大粒径微球与高浓度分析物的结合效果更佳。所以联用可扩展方法的线性范围。
5. 分别使用不同粒径微球可以分别建立其对应的标准曲线,在一定浓度范围内选择最佳的标准曲线进行样品的定量分析,提高结果的准确度。

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