古朵生物：Folin-酚试剂配制过程
方法：
试剂
试剂甲：
a液：na2co3 10.00g
naoh 2.00g
酒石酸钾钠(或钾盐钠盐) 0.25g
混合、溶于500ml蒸馏水中。
b液：cuso4·5h2o 0.5g
h2o 100.00ml
用前将a液50份与b液1份混合即为试剂甲。
试剂乙：
于磨口回流瓶加入下列试剂
na2wo4·2h2o 100.00g
namoo4·2h2o 25.00g
h2o 700.00ml
85%h3po4 50.00ml
浓hcl 100.00ml
按上回流冷凝管以小火回流10h后再加：
硫酸锂 150.00g
h2o 50.00ml
溴水 数滴
开口继续沸腾15min，驱除过量的溴，冷却后溶液呈黄色微带绿色(如仍呈绿色，须重复滴加液体溴步骤)。稀释至1l，过滤，滤液置于棕色瓶保存。使用时用标准naoh液滴定，以酚酞为指示剂，然后适当稀释(加水约1倍)使终浓度为1mol/l。
另外，如果money没有问题的话，可以直接买sigma公司的folin-酚试剂，有点贵。
标准曲线的制备
⑴ 取标准牛血清白蛋白2.50mg，溶于10ml蒸馏水中，使成250μg/ml。
⑵ 按表8-2稀释。
表8-2 标准曲线稀释方法
成分 试 管 号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
牛血清白蛋白标准品(ml) 0 0.2 0.2 0.4 0.1 0.6 0.6 0.8 0.8 1.0 1.0
生li盐水(ml) 1.0 0.8 0.8 0.6 0.6 0.4 0.4 0.2 0.2 0 0
蛋白含量(μg/ml) 0 50 50 100 100 150 150 200 200 250 250
⑶ 每管加试剂甲5ml，混合后室温放置10min，再加0.50ml试剂乙(即folin酚试剂)，立即摇匀(否则显色降低)。
⑷ 30min后测od650nm。
⑸ 以od为纵坐标，蛋白含量为横坐标，绘制标准曲线。
样品测定
⑴ 待测样品1ml(适当稀释至约含25μg-250μg/ml)。
⑵ 加试剂甲、乙。
⑶ 比色、测od650值。
⑷ 查标准曲线，求蛋白含量乘以稀释倍数，即为样品的蛋白含量。
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⑴ 取标准牛血清白蛋白2.50mg，溶于10ml蒸馏水中，使成250μg/ml。
⑵ 按表8-2稀释。
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牛血清白蛋白标准品(ml) 0 0.2 0.2 0.4 0.1 0.6 0.6 0.8 0.8 1.0 1.0
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⑸ 以od为纵坐标，蛋白含量为横坐标，绘制标准曲线。
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⑴ 待测样品1ml(适当稀释至约含25μg-250μg/ml)。
⑵ 加试剂甲、乙。
⑶ 比色、测od650值。
⑷ 查标准曲线，求蛋白含量乘以稀释倍数，即为样品的蛋白含量。
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