人28S抗核糖体抗体ELISA检测试剂盒操作步骤

人28s抗核糖体抗体elisa检测试剂盒操作步骤:
1、费用标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,依次进行稀释数倍。
2、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3、温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4、配液:将30倍(48t 的20 倍)浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6、加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7、温育:操作同3。
8、洗涤:操作同5。
9.在确保酶标板底无水滴及孔内无气泡后,立即用酶标仪在 450nm 波长测量各孔的光密度 (o.d. 值)。
10、显色:每孔先加入显色剂a50μl,再加入显色剂b50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色10分钟.
11、终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
12、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(od值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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