正确操作ultra液相色谱柱需注意以下事项

ultra液相色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺钉等组成。柱管多用不锈钢制成,压力不高于70kg/cm2时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有很高的光洁度。可分为填充柱和开管柱两大类。色谱柱的正确使用和维护十分重要,稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中,需要注意下列问题:
1、避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使ultra液相色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况;柱压的突然升高或降低也会冲动柱内填料,因此在调节流速时应该缓慢进行,在阀进样时阀的转动不能过缓。
2、应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然,流动相使用前必须经脱气和过滤处理。
3、一般说来不能反冲,只有生产者指明该柱可以反冲时,才可以反冲除去留在柱头的杂质。否则反冲会迅速降低柱效。
4、选择使用适宜的流动相(尤其是ph),以避免固定相被破坏。有时可以在进样器前面连接一预柱,分析柱是键合硅胶时,预柱为硅胶,可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”,避免分析柱中的硅胶基质被溶解,压力升高是需要更换预柱的信号。
5、避免将基质复杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内,需要对样品进行预处 理或者在进样器和ultra液相色谱柱之间连接一保护柱。保护柱一般是填有相似固定相的短柱。保护柱可以而且应该经常更换。

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