酶联免疫(elisa)是目前检验科常用的免疫学检测方法之一,其操作简单,无须特殊设备,使其在各级医院都有应用。但是,如果忽视了影响其结果的因素,难免会造成假阴性或假阳性,因此,了解影响实验的因素,减少差错事故的发生是极其必要的。
操作过程的影响因素
(一) 操作前应对实验的物理参数有充分的了解,如环境温度(保持在18 c~25℃)、反应孵育温度和孵育时间、洗涤的次数等,要先查看水育箱温度,是否符合要求。
(二)手工洗板加洗液时冲击力不要太大,洗涤次数不要超过说明书*的洗涤次数,洗液在反应孑l内滞留的时间不宜太长。不要使洗液在孑l间窜流,造成孔问污染,导致假阴性或假阳性。
(三) 正确使用加样器加样器应垂直加入标本或试剂,避免刮擦包被板底部。加样过程中避免液体外溅,血清残留在反应孔壁上,加样器吸头要清洗干净,避免污染,加样次序要与说明书一致,否则可导致结果错误,实验重复性差。
(四)要保证加液量一致 我们在使用时感觉滴瓶加液不如加样器好,滴瓶不易控制加液量不准,造成显色不统一,判断错误。
(五)显色液量不可过多 加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下,加显色系统后要避光反应,显色液量不能过多,以免显色过强。elisa试剂盒的影响因素应选用有批准文号,质量靠得住的产品,不能图便宜,忽视质量保证。
(六)试剂应妥善保存于4℃冰箱内,在使用时先平衡至室温,不同批号的试剂组分不宜交叉使用。试剂开启后要在一周内用完,剩余的试剂下次用时应先检查是否变质,显色剂如被污染变色将造成全部显色,导致错误结果。
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