Jackson欣博盛生物：Anti-Human IgE Antibodies
jackson欣博盛生物精品推荐——anti-human ige antibodies
jacksonlmmunoresearch推出一系列适用于诊断试剂研发的mouse monoclonal anti-human ige antibodies（小鼠抗人ige单克隆抗体），补充了jackson现有的抗人lgg、igm和lga抗体产品，抗人ige可与一系列特定的报告分子偶联（如碱性磷酸酶和生物素），使其具有极-强的灵敏度。
jacksonimmunresearch anti-human ige
jackson immunoresearch可提供两个不同克隆号（me.114和me.10a10）的抗人ige抗体，均为小鼠来源的单克隆抗体，与人lge反应，并且是ε链特异的。
小鼠抗人ige（clone: me.114, cat#209-002-241）可与一系列报告分子偶联，并可在多种实验应用中检测人ige，如elisa、侧向免疫层析、流式细胞术、wb和化学发光免疫分析（clia）。
小鼠抗人ige（clone: me.10a10，cat#209-002-244）是未标记的纯化抗体，在夹心法检测中可作为捕获抗体与标记的抗人ige抗体（clone: me.114）配对使用。
产品信息
标记类型
产品名称
产品货号
规格
unconjugated
igg fraction monoclonal mouse anti-human ige (me.114)
209-002-241
0.1 mg
igg fraction monoclonal mouse anti-human ige (10a10)
209-002-244
0.1 mg
horseradish peroxidase
peroxidase igg fraction monoclonal mouse anti-human ige (me.114)
209-032-241
0.5 ml
alkaline phosphatase
alkaline phosphatase igg fraction monoclonal mouse anti-human ige (me.114)
209-052-241
0.5 ml
biotin-sp (long spacer)
biotin-sp (long spacer) igg fraction monoclonal mouse anti-human ige (me.114)
209-062-241
0.25 ml
fluorescein (fitc)
fluorescein (fitc) igg fraction monoclonal mouse anti-human ige (me.114)
209-092-241
0.25 mg
r-phycoerythrin
r-phycoerythrin igg fraction monoclonal mouse anti-human ige (me.114)
209-112-241
0.1 ml
40 nm colloidal gold
40 nm colloidal gold igg fraction monoclonal mouse anti-human ige (me.114)
209-402-241
1 ml
特异性
jackson immunoresearch抗人igeε链特异性抗体已通过elisa测试，结果显示该抗体对人igg、igm或iga具有最小的交叉反应性。图1为验证抗人ige抗体（clone: me.114和me.10a10）特异性的wb结果图，结果显示未检测到其他类型的免疫球蛋白信号。jackson未测试是否可以检测到其他物种的免疫球蛋白。
图1.
a.直接蛋白印迹显示anti-human ige antibody(me.114)对人ige的特异性。每孔分别上样2ug纯化的人免疫球蛋白（ige、igg、iga和igm）。sds-page在非还原条件下进行，并将蛋白质印迹到硝化纤维素膜上。用含5%bsa的pbs/t封闭，并用hrp标记的anti-human ige（cat#209-032-241）以1:10000稀释孵育，使用ecl显色。
b.间接蛋白印迹显示anti-human ige antibody (10a10)抗人ige（clone: me.10a10）对人ige的特异性。每孔分别上样250ng纯化的人免疫球蛋白（ige、igg、iga和igm）。sds-page在非还原条件下进行，并将蛋白质印迹到硝化纤维素膜上。用含5%bsa的pbs/t封闭，2ug/ml的anti-human ige（cat#209-002-244）孵育。pbs/t洗涤后，用hrp标记的抗小鼠igg（cat#715-035-150）以1:10000稀释孵育，使用ecl显色。
图2.
a.在还原和非还原条件下使用anti-human ige (clone number me.114)检测100ng纯化人ige的wb结果。
b.在还原和非还原条件下使用anti-human ige (clone number 10a10)检测100ng纯化人ige的wb结果。
注：抗人ige（clone: me.114）和抗人ige（clone: me.10a10）对还原ige表现出较弱的信号，因此不建议两者用于检测还原ige。
灵敏度
jackson immunoresearch抗人ige抗体检测各种来源的人ige均具有优异的灵敏度。图3展示了anti-human ige (clone number me.114)在间接elisa中检测两种不同浓度ige包被板的灵敏度。图4展示了anti-human ige（clone: me.114）在间接elisa中检测不同骨髓瘤和血浆来源纯化ige的灵敏度。
图3：间接法elisa检测人ige。每孔加入100ul含2或0.2ug/ml的人血浆中纯化的ige的碳酸盐包被缓冲液进行包被，4℃过夜。每孔加入300ul含1%bsa（cat#001-000-161，不含igg、蛋白酶）的pbs/t封闭2小时。用pbs/t将一抗anti-human ige（cat#209-002-244）以1:3在板上连续稀释，并在室温下孵育2小时。二抗peroxidase affinipure goat anti-mouse igg, fcγ fragment specific (min x hu, bov, hrs sr prot)（cat#115-035-071），用pbs/t中以1:20000稀释，孵育1.5小时。加入tmb 30分钟后在620nm处读数。
图4：间接法elisa检测不同来源的人ige。每孔加入100ul含2ug/ml纯化人ige的碳酸盐包被缓冲液进行包被，4℃过夜。每孔加入300ul含1%bsa（cat#001-000-161）的pbs/t在室温下封闭2小时。用pbs/t将一抗anti-human ige（cat#209-002-241）以1:3在板上连续稀释，并在室温下孵育1小时。二抗peroxidase affinipure goat anti-mouse igg, fcγ fragment specific (min x hu, bov, hrs sr prot)（cat#115-035-071）以1:20000稀释，孵育1.5小时。加入tmb 30分钟后在620nm处读数。
检测血浆中ige
jackson immunoresearch抗人ige与其配对的捕获抗体配合用于夹心法elisa时具有极-好的灵敏度。两种不同的单克隆抗体可以配对使用以进行捕获和检测。在这种情况下，用牛血清白蛋白（cat#001-000-161，不含igg与蛋白酶）封闭前，使用未标记的anti-human ige（clone: me.10a10，cat#209-002-244）作为包被抗体，洗涤后，与稀释后的样品一起孵育。选择标记的anti-human ige antibody，例如alkaline phosphatase anti-human ige (cat#209-052-241)，或者peroxidase anti-human ige (cat#209-032-241)，接着使用合适的底物或显色技术。图5展示了直接夹心法elisa验证非偶联的抗人ige与碱性磷酸酶标记的检测抗体搭配使用来定量检测患者样本中的总ige。本实验中使用样本的总ige（kiu/l）已通过罗氏cobas total ige assay检测（结果详见图5的x轴）。
图5.直接夹心法elisa检测人血清和血浆样品中的总ige。用2ug/ml未标记的anti-human ige（clone: me.10a10，cat#209-002-244）包板，100μl/孔，4℃过夜。每孔加入300ul含1%bsa（cat#001-000-161）的pbs/t（0.05%吐温）封闭1.5小时，随后加入用pbs/t以1:80稀释的样品孵育1小时，100ul/孔。检测抗体，碱性磷酸酶偶联的抗人ige（cat#209-055-241），用pbs/t中以1:10000稀释，100ul/孔孵育1小时。每孔加入100ul 新鲜配制的dea底物孵育30分钟，在405nm处读数。
推荐稀释倍数
下表中的建议稀释倍数用范围表示，因为最佳的稀释度与许多因素有关，如抗原密度，渗透性等。使用者应根据自己的实验来确定抗体最佳的工作浓度。
conjugate
elisa
weatern blot*
flow cytometry
uncojugated
10-20 ug/ml
fitc
1:50—1:200
r-pe
1:50—1:200
horseradish peroxidase
1:5,000—1:100,000
1:5,000—1:100,000 (non-ecl)
1:10,000—1:200,000 (ecl)
alkaline phosphatase
1:5,000—1:50,000
1:5,000—1:50,000
biotin-sp(using fluorphore-conjugates streptavidin)
1:200—1:1,000
biotin-sp(using enzyme-conjugates streptavidin)
1:20,000—1:400,000
1:20,000—1:400,000
*请注意，当检测还原性蛋白质时，该抗体将给出较弱的信号，因此不建议用于需要通过蛋白质印迹检测还原ige的应用。
参考文献
1.cox, l., larenas-linnemann, d., lockey, r. and passalacqua, g., 2010. speaking the same language: the world allergy organization subcutaneous immunotherapy systemic reaction grading system. journal of allergy and clinical immunology, 125(3), pp.569-574.e7.
2.pawankar, r., canonica, g., holgate, s., and lockey, r., 2011. world allergy organization (wao) white book on allergy. united kingdom: wao.
3.sánchez-borges, m., ansotegui, i. & cox, l. world allergy organization grading system for systemic allergic reactions: it is time to speak the same language when it comes to allergic reactions. curr treat options allergy 6, 388–395 (2019).
详情请联系 jackson immunoresearch 中国授权代理-欣博盛生物科技
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jacksonimmunresearch anti-human ige
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产品信息
标记类型
产品名称
产品货号
规格
unconjugated
igg fraction monoclonal mouse anti-human ige (me.114)
209-002-241
0.1 mg
igg fraction monoclonal mouse anti-human ige (10a10)
209-002-244
0.1 mg
horseradish peroxidase
peroxidase igg fraction monoclonal mouse anti-human ige (me.114)
209-032-241
0.5 ml
alkaline phosphatase
alkaline phosphatase igg fraction monoclonal mouse anti-human ige (me.114)
209-052-241
0.5 ml
biotin-sp (long spacer)
biotin-sp (long spacer) igg fraction monoclonal mouse anti-human ige (me.114)
209-062-241
0.25 ml
fluorescein (fitc)
fluorescein (fitc) igg fraction monoclonal mouse anti-human ige (me.114)
209-092-241
0.25 mg
r-phycoerythrin
r-phycoerythrin igg fraction monoclonal mouse anti-human ige (me.114)
209-112-241
0.1 ml
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209-402-241
1 ml
特异性
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图1.
a.直接蛋白印迹显示anti-human ige antibody(me.114)对人ige的特异性。每孔分别上样2ug纯化的人免疫球蛋白（ige、igg、iga和igm）。sds-page在非还原条件下进行，并将蛋白质印迹到硝化纤维素膜上。用含5%bsa的pbs/t封闭，并用hrp标记的anti-human ige（cat#209-032-241）以1:10000稀释孵育，使用ecl显色。
b.间接蛋白印迹显示anti-human ige antibody (10a10)抗人ige（clone: me.10a10）对人ige的特异性。每孔分别上样250ng纯化的人免疫球蛋白（ige、igg、iga和igm）。sds-page在非还原条件下进行，并将蛋白质印迹到硝化纤维素膜上。用含5%bsa的pbs/t封闭，2ug/ml的anti-human ige（cat#209-002-244）孵育。pbs/t洗涤后，用hrp标记的抗小鼠igg（cat#715-035-150）以1:10000稀释孵育，使用ecl显色。
图2.
a.在还原和非还原条件下使用anti-human ige (clone number me.114)检测100ng纯化人ige的wb结果。
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注：抗人ige（clone: me.114）和抗人ige（clone: me.10a10）对还原ige表现出较弱的信号，因此不建议两者用于检测还原ige。
灵敏度
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图3：间接法elisa检测人ige。每孔加入100ul含2或0.2ug/ml的人血浆中纯化的ige的碳酸盐包被缓冲液进行包被，4℃过夜。每孔加入300ul含1%bsa（cat#001-000-161，不含igg、蛋白酶）的pbs/t封闭2小时。用pbs/t将一抗anti-human ige（cat#209-002-244）以1:3在板上连续稀释，并在室温下孵育2小时。二抗peroxidase affinipure goat anti-mouse igg, fcγ fragment specific (min x hu, bov, hrs sr prot)（cat#115-035-071），用pbs/t中以1:20000稀释，孵育1.5小时。加入tmb 30分钟后在620nm处读数。
图4：间接法elisa检测不同来源的人ige。每孔加入100ul含2ug/ml纯化人ige的碳酸盐包被缓冲液进行包被，4℃过夜。每孔加入300ul含1%bsa（cat#001-000-161）的pbs/t在室温下封闭2小时。用pbs/t将一抗anti-human ige（cat#209-002-241）以1:3在板上连续稀释，并在室温下孵育1小时。二抗peroxidase affinipure goat anti-mouse igg, fcγ fragment specific (min x hu, bov, hrs sr prot)（cat#115-035-071）以1:20000稀释，孵育1.5小时。加入tmb 30分钟后在620nm处读数。
检测血浆中ige
jackson immunoresearch抗人ige与其配对的捕获抗体配合用于夹心法elisa时具有极-好的灵敏度。两种不同的单克隆抗体可以配对使用以进行捕获和检测。在这种情况下，用牛血清白蛋白（cat#001-000-161，不含igg与蛋白酶）封闭前，使用未标记的anti-human ige（clone: me.10a10，cat#209-002-244）作为包被抗体，洗涤后，与稀释后的样品一起孵育。选择标记的anti-human ige antibody，例如alkaline phosphatase anti-human ige (cat#209-052-241)，或者peroxidase anti-human ige (cat#209-032-241)，接着使用合适的底物或显色技术。图5展示了直接夹心法elisa验证非偶联的抗人ige与碱性磷酸酶标记的检测抗体搭配使用来定量检测患者样本中的总ige。本实验中使用样本的总ige（kiu/l）已通过罗氏cobas total ige assay检测（结果详见图5的x轴）。
图5.直接夹心法elisa检测人血清和血浆样品中的总ige。用2ug/ml未标记的anti-human ige（clone: me.10a10，cat#209-002-244）包板，100μl/孔，4℃过夜。每孔加入300ul含1%bsa（cat#001-000-161）的pbs/t（0.05%吐温）封闭1.5小时，随后加入用pbs/t以1:80稀释的样品孵育1小时，100ul/孔。检测抗体，碱性磷酸酶偶联的抗人ige（cat#209-055-241），用pbs/t中以1:10000稀释，100ul/孔孵育1小时。每孔加入100ul 新鲜配制的dea底物孵育30分钟，在405nm处读数。
推荐稀释倍数
下表中的建议稀释倍数用范围表示，因为最佳的稀释度与许多因素有关，如抗原密度，渗透性等。使用者应根据自己的实验来确定抗体最佳的工作浓度。
conjugate
elisa
weatern blot*
flow cytometry
uncojugated
10-20 ug/ml
fitc
1:50—1:200
r-pe
1:50—1:200
horseradish peroxidase
1:5,000—1:100,000
1:5,000—1:100,000 (non-ecl)
1:10,000—1:200,000 (ecl)
alkaline phosphatase
1:5,000—1:50,000
1:5,000—1:50,000
biotin-sp(using fluorphore-conjugates streptavidin)
1:200—1:1,000
biotin-sp(using enzyme-conjugates streptavidin)
1:20,000—1:400,000
1:20,000—1:400,000
*请注意，当检测还原性蛋白质时，该抗体将给出较弱的信号，因此不建议用于需要通过蛋白质印迹检测还原ige的应用。
参考文献
1.cox, l., larenas-linnemann, d., lockey, r. and passalacqua, g., 2010. speaking the same language: the world allergy organization subcutaneous immunotherapy systemic reaction grading system. journal of allergy and clinical immunology, 125(3), pp.569-574.e7.
2.pawankar, r., canonica, g., holgate, s., and lockey, r., 2011. world allergy organization (wao) white book on allergy. united kingdom: wao.
3.sánchez-borges, m., ansotegui, i. & cox, l. world allergy organization grading system for systemic allergic reactions: it is time to speak the same language when it comes to allergic reactions. curr treat options allergy 6, 388–395 (2019).
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MAC*子弹阀，美国MAC总代理商
C23174空气滤芯的作用
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