大鼠细胞色素P450（CYP450）ELISA试剂盒说明书
大鼠细胞色素p450(cyp450)elisa试剂盒说明书
l 本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中大鼠细胞色素p450(cyp450)的含量。
l 有效期：6个月
l 保存条件：2-8℃
大鼠细胞色素p450(cyp450)elisa试剂盒实验原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（elisa）。往预先包被大鼠细胞色素p450(cyp450)捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、hrp标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物tmb显色，tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成zui终的黄色。颜色的深浅和样品中的大鼠细胞色素p450(cyp450)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（od 值），计算样品浓度。
大鼠细胞色素p450(cyp450)elisa试剂盒样本处理及要求
1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：可用edta或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8°c 1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：标本溶血会影响zui后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
需要而未提供的试剂和器材
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10ul、2-20ul、20-200ul、200-1000ul
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水
大鼠细胞色素p450(cyp450)elisa试剂盒问题解析：
1.试剂的选择：选择优良试剂大家都是知道的，但是在检测之前还应该提前半个小时将试剂拿到常温下进行解冻。
2.加样中可能遇到的问题：在做血清或是血浆用于检测试剂的时候，会碰到血清血浆不好分离的情况，这个时候的解决办法是先放在常温中1到2小时，然后在进行离心处理
3.洗板时容易造成误差： 因为洗板是人工洗的，所以判断什么时候洗干净了也是人为判断的，这个时候带有主观色彩，所以多清洗几次，还有就是在洗的时候孔与孔之间的液体容易交叉流动
4.显色问题： 使用了过期的显色剂或者是显色剂用过后放置时间太长，都有可能造成显色剂不显色。所以在进行显色反应的时候，要先查看显色剂本身的情况
5.终止反应：在加终止剂的时候由于倾倒速度快，差生气泡，造成假阳性结果。所以在倒终止剂的时候要缓慢倒
6.读板：读板的时候首先应该保证板的清洁干净
试剂准备
试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。
20×洗涤缓冲液的稀释：蒸馏水按1：20稀释，即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。
操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μl；
3. 样本孔中加入待测样本50μl；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（hrp）标记的检测抗体100μl，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μl），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物a、b各50μl，37℃避光孵育15min。
7. 每孔加入终止液50μl，15min内，在450nm波长处测定各孔的od值。
实验结果计算
以所测标准品的od值为横坐标，标准品的浓度值为纵坐标，在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线，并得到直线回归方程，将样品的od值代入方程，计算出样品的浓度。
试剂盒性能
1. 检测范围：3.75 ng/ml – 120 ng/ml。
2. 灵敏度：zui低检测浓度小于0.1 ng/ml。
3. 特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15% 。
大鼠细胞色素p450(cyp450)elisa试剂盒相关产品*：
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人细胞色素p450(cyp450)elisa试剂盒
大鼠ⅱ型胶原α1(col2α1)elisa试剂盒
人特异性巨噬细胞武装因子(smaf)elisa试剂盒
大鼠基质金属蛋白酶抑制因子3(timp-3)elisa试剂盒
注释：本公司所有产品仅用于科研，不得用于临床。
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1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：可用edta或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8°c 1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
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2.加样中可能遇到的问题：在做血清或是血浆用于检测试剂的时候，会碰到血清血浆不好分离的情况，这个时候的解决办法是先放在常温中1到2小时，然后在进行离心处理
3.洗板时容易造成误差： 因为洗板是人工洗的，所以判断什么时候洗干净了也是人为判断的，这个时候带有主观色彩，所以多清洗几次，还有就是在洗的时候孔与孔之间的液体容易交叉流动
4.显色问题： 使用了过期的显色剂或者是显色剂用过后放置时间太长，都有可能造成显色剂不显色。所以在进行显色反应的时候，要先查看显色剂本身的情况
5.终止反应：在加终止剂的时候由于倾倒速度快，差生气泡，造成假阳性结果。所以在倒终止剂的时候要缓慢倒
6.读板：读板的时候首先应该保证板的清洁干净
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操作步骤
1. 从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。
2. 设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μl；
3. 样本孔中加入待测样本50μl；空白孔不加。
4. 除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶（hrp）标记的检测抗体100μl，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
5. 弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液（350μl），静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次（也可用洗板机洗板）。
6. 每孔加入底物a、b各50μl，37℃避光孵育15min。
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1. 检测范围：3.75 ng/ml – 120 ng/ml。
2. 灵敏度：zui低检测浓度小于0.1 ng/ml。
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4. 重复性：板内变异系数小于10% ，板间变异系数小于15% 。
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注释：本公司所有产品仅用于科研，不得用于临床。
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电热鼓风干燥箱常见故障及排除方法
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