AC29 贴壁细胞操作步骤
细胞：ac29细胞
中文名称：小鼠恶性间皮瘤细胞
生长特性：贴壁细胞
培养基：1640培养基 血清：10%fbs（gibco胎牛血清）
荧光株：ac29-rfp荧光标记细胞株ac29-gfp荧光标记细胞株ac29-luc荧光标记细胞株
耐药株：ac29-ddp耐药株ac29-ptx耐药株ac29-adm耐药株
细胞检测服务：ac29细胞种属鉴定（细胞检测技术服务可直接咨询客服 ）
贴壁细胞签收操作：
1. 收到细胞后请尽快更换为含 15% 血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加 10% 的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时）
2. 贴壁细胞收到后切忌立刻进行消化，将细胞换液后放置培养箱孵育 6-8 小时或过夜再做消化传代。
（网络信息主针对网络推广作用，仅供参考，细胞培养血清注意事项请咨询细胞库管理员，以细胞库管理员提供给您的信息为准，操作前，如果有不明白之处，先咨询细胞库管理员，避免不必要的损失；）
细胞常规培养传代流程（ 请严格遵照无菌操作）
1． 吸出原培养瓶中的培养基，pbs 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min）
2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉yi酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。
3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。
4． 注意培养基 ph 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或者冻存。
内皮抑素(endostatin)一种具有抑制血管生长的蛋白质.
休眠蛋白(restin)是内皮抑素的同源蛋白质,它来源于胶原蛋白xv的羧端非胶原蛋白结构域(nc1)。
为了研究鼠源休眠蛋白对内皮细胞生长的影响, 利用rt-pcr从鼠肌肉中扩增出它的基因, 克隆入原核表达载体pqe32。
诱导后, 重组蛋白质以包涵体形式高效表达, 表达量约占菌体总蛋白质的60%～70%。
重组蛋白质经纯化复性后, 可以特异地抑制bfgf刺激的牛主动脉内皮细胞的增殖, 但是休眠蛋白的抑制活性比内皮抑素活性稍低.
流式细胞仪检测发现, 休眠蛋白可以引起内皮细胞的细胞周期的改变, 并且引起细胞凋亡。
关键词：培养箱 流式细胞仪
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1. 收到细胞后请尽快更换为含 15% 血清的新鲜培养基，如因特殊情况需要继续使用原瓶培养基，请在原瓶培养基中额外添加 10% 的血清（原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过 72 小时）
2. 贴壁细胞收到后切忌立刻进行消化，将细胞换液后放置培养箱孵育 6-8 小时或过夜再做消化传代。
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1． 吸出原培养瓶中的培养基，pbs 缓冲液润洗细胞两次，加 2-3 ml 0.25% yi酶进行消化细胞（注意把握消化时间，通常控制在 1-2min）
2． 镜下观察消化情况，在细胞边缘缩小，贴壁松动时（不建议消化到细胞漂浮）去掉yi酶，加 6~8ml 培养基，轻轻吹打细胞层，尽量把细胞层吹落，吹散。
3． 取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中，添加适当的培养基，把细胞悬液打匀，于培养箱中培养。
4． 注意培养基 ph 值变化情况，定期换液（每周 2-3 次），待细胞密度达到 80%以后重复 1 项操作或者冻存。
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休眠蛋白(restin)是内皮抑素的同源蛋白质,它来源于胶原蛋白xv的羧端非胶原蛋白结构域(nc1)。
为了研究鼠源休眠蛋白对内皮细胞生长的影响, 利用rt-pcr从鼠肌肉中扩增出它的基因, 克隆入原核表达载体pqe32。
诱导后, 重组蛋白质以包涵体形式高效表达, 表达量约占菌体总蛋白质的60%～70%。
重组蛋白质经纯化复性后, 可以特异地抑制bfgf刺激的牛主动脉内皮细胞的增殖, 但是休眠蛋白的抑制活性比内皮抑素活性稍低.
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