海藻糖酶(treh)真核蛋白操作步骤:
ⅰ 实体组织蛋白的提取
1. 在每1ml 冷lysis buffer加入10 μl磷酸酶抑制剂, 1 μl蛋白酶抑制剂和 5μl 100mm pmsf,混匀。冰上保存数分钟待用。
2. 每100mg固体组织置于培养皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小块,加入0.5~1 ml冷 lysis buffer,玻璃匀浆器上下手动匀浆15次,注意低温操作;
3. 取组织匀浆液转移到1.5ml预冷的离心管,离心10000转/分,4℃离心5 min;
4. 取上清转移至新的预冷的离心管中,即为全蛋白提取物,蛋白定量(bradford法、bca法);
5. 分装保存于-70℃,避免反复冻融。
ⅱ 培养细胞蛋白提取
1. 贴壁培养的细胞,吸去培养基后,加入10ml/150mm培养板的冷pbs洗两次,每次振摇数次以尽量去除培养液;
2. 悬浮培养的细胞或用细胞刮子刮下的贴壁细胞,将细胞及培养液移至离心管中, 1000转/分离心10 min,再用10ml/150mm培养板的冷pbs,1000转/分离心5 min洗两次;
3. 在每 1ml冷 lysis buffer加入10μl磷酸酶抑制剂, 1μl蛋白酶抑制剂和5μl 100mm pmsf,混匀。冰上保存数分钟待用。
4. 细胞洗涤后,转至新的预冷的离心管中,加入上述配制好的冷lysis buffer,加入量如下表所示:
细胞数量
lysis buffer加入量
107个
0.5 ml~1 ml
5×106个
0.2 ml~0.5 ml
5.置于4℃摇床平台上,温和振荡15 min;
6. 14,000rpm,4℃离心15min,取上清为全蛋白提取物, 蛋白定量(bradford法、bca法);
7. 分装保存于-70℃,避免反复冻融
硅胶膜dna离心吸附柱(大提)收集管(见关联产品)
硅胶膜离心吸附柱(小提)收集器(见关联产品)
硅胶膜离心吸附柱系列(15层膜,小提)
硅胶膜离心吸附柱再生液
生物磁珠2:壳聚糖磁珠
生物磁珠2:巯基磁珠(停产)
生物磁珠2:醛基磁珠(停产)
生物磁珠2:无包被磁珠
生物磁珠:氨基磁珠
生物磁珠:硅基磁珠
生物磁珠:环氧基磁珠
生物磁珠:羧基磁珠
酸洗玻璃珠系列
微量单链dna定量试剂盒核酸电泳套装
一站式dna非变性page电泳套装
一站式dna尿素-page电泳套装
一站式mirna尿素-page电泳套装
一站式rna电泳套装
核酸电泳液
50×tae电泳液(2500 ml)
rna电泳液,10×(100 ml)
rna电泳液,10×(250 ml)
tbe running buffer(tbe电泳液,10×)
超快核酸电泳液(干粉)(20 l)
超快核酸电泳液(干粉)(50 l)
核酸电泳液:50×tae电泳液(250 ml)
河源30阻火模块一立方多少钱
DZJ-30 多功能真空滤油机【上海康登电气】概述
基坑及支护结构的监测点布置
土壤检测仪构建和谐的生态环境
长寿命钢制拖链在连铸机上的应用
海藻糖酶(TREH)真核蛋白操作步骤
科绿特鼓风干燥箱如何做到节能省电
针对直流电阻测试仪的使用方法,如何正确操作更加合适呢?
气动衬氟三通球阀的特点
院士专家呼吁:让新成果在中国科技期刊上
反渗透膜在茶饮料制作中的应用及概述
你对蛋白质含量的了解有多少?
KRACHT溢流阀提供泄压的作用
提高磨床加工效率的案例分析
电热鼓风干燥箱注意事项和维护修理
分光测色仪在面膜包装袋颜色测量上的应用(转载)
固体制剂生产线结构
CKD气缸剩余气体量不足会报警
yoritsu4118A日本共立回路阻抗测试仪产品介绍
海康威视DS-7608NB-K1 8路单盘位网络监控硬盘录像机