单细胞ICP-MS应用：评估卵巢癌细胞对*的摄入
铂类*药物是非常*的一类*药物。目前铂类*药物已经研制了三代，分别是一代*，二代*、*；三代*、*。*的有效性是由于其可以与dna 结合从而导致dna- 铂（pt）加合物的形成，但这也会造成dna 的弯曲。因此在*后细胞必须修复dna 损伤，否则dna 复制受阻会导致细胞死亡。
许多癌症患者初对基于铂类的治疗比较敏感，但一段时间后，患者通常对*治疗表现出耐药性，导致了癌症的复发。*耐药性归因于三种主要的分子机制：dna 修复的加速，胞浆失活的加速和细胞摄取药物能力的变化。其中，细胞摄取药物能力的变化主要表现在细胞对*的摄入能力降低或者*转运的加速。
分析单个细胞水平对*的摄入和分布对于评估治疗的有效性具有非常重要的意义。
传统方法是，将细胞群置于*培养液中，然后使用原子吸收光谱（aas）或者电感耦合等离子体质谱（icp-ms）等技术测定细胞群内铂的总量，无法体现*摄入在个体细胞之间的分布和差异。实际上，细胞对*的摄入有可能根据个体有很大差异，但至今还没有有效的方法来评估。
本文使用全新的技术，可对金属在单一细胞水平上进行定量：单细胞电感耦合等离子体质谱 (sc-icp-ms)。
01样品
所有实验使用卵巢癌细胞为a2780 和a2780/cp70 细胞系。其中，a2780 是*敏感细胞系, 而a2780/cp70 是*耐药型。
按照下图所示流程处理。
02仪器
nexion® 电感耦合等离子体质谱（icp-ms），结合syngistix™ 单细胞应用软件模块进行数据采集和处理。
nexion 2000 icp-ms
表1.icp-ms仪器条件
03实验结果
细胞对*的摄入可利用时间过程实验来研究，即分析*在细胞群内的分布如何随时间变化。将两个细胞系置于30μm*培养液中1，2，4 和8 小时。
如图可见，与*耐药细胞a2780/cp70 相比，a2780 随时间推移能摄入更多的*。
为了判断*摄入的差异性分布是否归因于细胞周期的不同，还对细胞进行了血清饥饿实验。
04结论
sc-icp-ms 是一种在单细胞水平上稳定测量铂的方法。本文利用卵巢癌细胞系a2780 和a2780/cp70 表征了随着时间增加*的摄入有所增长。相比a2780 敏感细胞系，*摄入在耐药性的a2780/cp70 细胞系上水平降低。*摄入的细胞差异性不是由于细胞周期的不同，因为血清饥饿细胞并不改变*的整体摄入。*摄入的胞内差异性是由于其他尚未确定的因素造成的。
想要了解更多详情，请扫描二维码下载完整的应用报告。
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