细胞学堂 | 293细胞系家族谱系大揭秘
hek293细胞的起源
hek293细胞的历史可以追溯到1973年，当时荷兰莱顿大学的alex van der eb博士和frank graham博士在研究人类腺病毒（adenovirus）时培养了这种细胞，细胞命名中的数字可以追溯到他的第293次实验产生的原始细胞克隆这一事实。通过腺病毒5（ad5 dna）进行了转染，由于存在ad5 e1a/b基因，使其细胞周期以及细胞表型、核型等发生了改变，获得永生化特性，在生产腺病毒载体和腺相关病毒载体、生产蛋白、疫苗、抗癌试剂以及细胞生物学研究上广泛应用。
hek293细胞系的特点和用途
目前为止，hek293细胞有多种衍生细胞系，每种细胞系的特点不尽相同，用途也存在着差异。今天小普给大家介绍下有关293t、293f、293h和293s四大分支细胞的特点及用途。
hek293细胞系及其衍生/历史的示意图
hek293t
它是hek293细胞系的亚克隆，经过修饰表达sv40 t抗原，其表达的sv40t抗原可以实现外源表达载体的扩增，最终增加目的基因表达，常用于慢病毒、逆转录病毒及腺病毒的包装。
hek293h
来自表达e1a腺病毒基因的hek293细胞，粘附性较强，常用于噬菌斑检测实验和重组蛋白的表达和生产。在293h细胞中插入ebna-1基因可得到293e，该基因含有ebv复制起点（orip）的重组表达载体，能够在h293e细胞中复制，显著提高蛋白的表达；293-6e细胞是在293-h细胞表达截断的ebna1，其能够在无血清培养体系中进行蛋白表达及病毒载体的生产。
hek293f
由hek293细胞系衍生的一个可以在无血清培养基中快速增长的细胞系，可以高效表达蛋白。由293f细胞导入pcmvsport6tag.neo质粒可获得293ft，可以用于生产慢病毒载体和基因编辑等领域。293ftm细胞是由flp-intm t-rextm 293细胞导入单嗜性（ecotropic）报告质粒和mappit (mammalian protein-protein interaction trap) 报告质粒获得，常用于蛋白互作筛选。
hek293s
用逐渐适应性培养的方法，将细胞驯化成能够悬浮培养且耐受低ca2+培养的细胞系，即293s细胞。293s细胞用甲烷磺酸诱变和蓖麻毒素选择修饰，再转染pcdna6/tr质粒，得到293sg细胞，常用于同源的n-糖基化蛋白的表达。此外，该细胞系中具有四环素表达抑制基因，也可用于四环素诱导的蛋白表达研究。；用pcdna3.1-zeo-stendot质粒对293sg细胞进行转化，得到293sggd细胞，用于糖基化工程研究中。
hek293细胞的应用
hek293细胞在一些研究领域中的应用非常广泛，概述如下：
受体信号
hek293可用于离子通道和细胞膜受体的异源表达，通常用来研究与疾病相关的g蛋白偶联受体信号通路。
癌症研究
hek293细胞具有致瘤性，常用于癌症研究。适用于测试分析癌症治疗效果。
蛋白质生产
hek293细胞可大量产生重组蛋白，可用于开发生产疫苗和生物治疗性蛋白。
基因表达实验
hek293细胞常用于转染，检测表达基因或蛋白，更好的研究基因表达和功能，蛋白质功能以及基因突变等。
参考文献
1. hu j, han j, li h, et al. human embryonic kidney 293 cells: a vehicle for biopharmaceutical manufacturing, structural biology, and electrophysiology. cells tissues organs. 2018;205(1):1-8. doi:10.1159/000485501
2. stepanenko aa, dmitrenko vv. hek293 in cell biology and cancer research: phenotype, karyotype, tumorigenicity, and stress-induced genome-phenotype evolution. gene. 2015;569(2):182-190. doi:10.1016/j.gene.2015.05.065
3. lin yc, boone m, meuris l, et al. genome dynamics of the human embryonic kidney 293 lineage in response to cell biology manipulations. nat commun. 2014;5:4767. published 2014 sep 3. doi:10.1038/ncomms5767
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hek293细胞系的特点和用途
目前为止，hek293细胞有多种衍生细胞系，每种细胞系的特点不尽相同，用途也存在着差异。今天小普给大家介绍下有关293t、293f、293h和293s四大分支细胞的特点及用途。
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hek293t
它是hek293细胞系的亚克隆，经过修饰表达sv40 t抗原，其表达的sv40t抗原可以实现外源表达载体的扩增，最终增加目的基因表达，常用于慢病毒、逆转录病毒及腺病毒的包装。
hek293h
来自表达e1a腺病毒基因的hek293细胞，粘附性较强，常用于噬菌斑检测实验和重组蛋白的表达和生产。在293h细胞中插入ebna-1基因可得到293e，该基因含有ebv复制起点（orip）的重组表达载体，能够在h293e细胞中复制，显著提高蛋白的表达；293-6e细胞是在293-h细胞表达截断的ebna1，其能够在无血清培养体系中进行蛋白表达及病毒载体的生产。
hek293f
由hek293细胞系衍生的一个可以在无血清培养基中快速增长的细胞系，可以高效表达蛋白。由293f细胞导入pcmvsport6tag.neo质粒可获得293ft，可以用于生产慢病毒载体和基因编辑等领域。293ftm细胞是由flp-intm t-rextm 293细胞导入单嗜性（ecotropic）报告质粒和mappit (mammalian protein-protein interaction trap) 报告质粒获得，常用于蛋白互作筛选。
hek293s
用逐渐适应性培养的方法，将细胞驯化成能够悬浮培养且耐受低ca2+培养的细胞系，即293s细胞。293s细胞用甲烷磺酸诱变和蓖麻毒素选择修饰，再转染pcdna6/tr质粒，得到293sg细胞，常用于同源的n-糖基化蛋白的表达。此外，该细胞系中具有四环素表达抑制基因，也可用于四环素诱导的蛋白表达研究。；用pcdna3.1-zeo-stendot质粒对293sg细胞进行转化，得到293sggd细胞，用于糖基化工程研究中。
hek293细胞的应用
hek293细胞在一些研究领域中的应用非常广泛，概述如下：
受体信号
hek293可用于离子通道和细胞膜受体的异源表达，通常用来研究与疾病相关的g蛋白偶联受体信号通路。
癌症研究
hek293细胞具有致瘤性，常用于癌症研究。适用于测试分析癌症治疗效果。
蛋白质生产
hek293细胞可大量产生重组蛋白，可用于开发生产疫苗和生物治疗性蛋白。
基因表达实验
hek293细胞常用于转染，检测表达基因或蛋白，更好的研究基因表达和功能，蛋白质功能以及基因突变等。
参考文献
1. hu j, han j, li h, et al. human embryonic kidney 293 cells: a vehicle for biopharmaceutical manufacturing, structural biology, and electrophysiology. cells tissues organs. 2018;205(1):1-8. doi:10.1159/000485501
2. stepanenko aa, dmitrenko vv. hek293 in cell biology and cancer research: phenotype, karyotype, tumorigenicity, and stress-induced genome-phenotype evolution. gene. 2015;569(2):182-190. doi:10.1016/j.gene.2015.05.065
3. lin yc, boone m, meuris l, et al. genome dynamics of the human embryonic kidney 293 lineage in response to cell biology manipulations. nat commun. 2014;5:4767. published 2014 sep 3. doi:10.1038/ncomms5767
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