人胰岛素原 (PI)ELISA kit使用说明书
人胰岛素原 (pi)elisa使用说明书
胰岛素原(pi)是胰岛素的前体激素，它是由由胰岛β细胞合成和分泌，主要在肾脏分解代谢。生理情况下，只有极少量的胰岛素原释放入血，在病理情况下，胰岛β细胞释放胰岛素原增多，血中胰岛素原水平升高。它是细胞在裂解成成熟胰岛素之前分泌的最后一个单链蛋白结构。它是由芝加哥大学的donaldf. steiner教授在1967年发现的。
本试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验（elisa）。往预先包被有人胰岛素原(pi)捕获抗体的微孔中，依次加入样本、标准品、生物素标记的检测抗体，hrp酶结合物，中间经过温育和洗涤，用底物tmb显色，tmb在过氧化物酶(hrp)的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色 的深浅和样品中的人胰岛素原(pi)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定
吸光度（od值），计算样品浓度。
灵敏度：4.79pg/ml
检测范围：12.5-800pg/ml
特异性：可检测样本中人的pi，且与其类似物无明显交叉反应。
浓度(pg/ml)
800
400
200
100
50
25
12.5
0
od值
2.32
1.93
1.31
0.85
0.51
0.39
0.28
0.1
校正od值
2.22
1.83
1.21
0.75
0.41
0.29
0.18
-
试剂盒性能：
1. 重复性：板内变异系数小于 10%，板间变异系数小于 10%。
2. 回收率：在选取的健康人血清、血浆和细胞培养上清中加入 3 个不同
浓度水平的人pi，计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84-101
96
血浆(n=8)
92-105
102
细胞培养上清(n=8)
96-108
105
3.线性稀释：分别在选取的4份健康人血清、血浆和细胞培养上清中加入
高浓度人pi，在标准曲线动力学范围内进行稀释，评估线性。
稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1：2
范围
84-95
88-97
90-110
平均回收率
91
93
96
1：4
范围
89-103
87-108
105-115
平均回收率
94
98
109
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100
50
25
12.5
0
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1.93
1.31
0.85
0.51
0.39
0.28
0.1
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0.41
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0.18
-
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2. 回收率：在选取的健康人血清、血浆和细胞培养上清中加入 3 个不同
浓度水平的人pi，计算回收率。
样本类型
范围（%）
平均回收率（%）
血清(n=8)
84-101
96
血浆(n=8)
92-105
102
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96-108
105
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稀释比例
回收率（%）
血清
血浆
细胞培养上清
1：2
范围
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88-97
90-110
平均回收率
91
93
96
1：4
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