荧光探针和荧光染料冻干防护
冻干对荧光探针和荧光染料有防护作用，冻干可防止探针和染料降解，提高反应的灵敏度和特异性。接着介绍一下荧光探针和荧光染料的特性。荧光探针是pcr扩增时在加入一对引物的同时加入荧光探针，探针完整时，报告基团发射的荧光信号被淬灭基团吸收；pcr扩增时，taq酶的5'－3'外切酶活性将探针酶切降解，使报告荧光基团和淬灭荧光基团分离，从而荧光监测系统可接收到荧光信号，每扩增一条dna链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与pcr产物形成*同步。荧光染料是在pcr反应体系中，加入过量sybr荧光染料，sybr荧光染料非特异性地掺入dna双链后，发射荧光信号，而不掺入链中的sybr染料分子不会发射任何荧光信号，从而保证荧光信号的增加与pcr产物的增加*同步。sybr仅与双链dna进行结合，因此可以通过溶解曲线，确定pcr反应是否特异。低温预冻，低温真空干燥，过程隔离氧气水分，冻干法可*防止荧光物质降解。试剂冻干机pilot3-6t ivd方面应用示例（荧光pcr）：
探针、底物、引物原料要求确定。冻干溶液配方开发，采用正交法或响应曲面法进行辅料筛选。选择适合的包材和模具。设计冻干曲线配合辅料筛选。确定配方及工艺。稳定性测试。根据稳定性测试结果修正工艺或配方。整个环节注意环境、设备、人员的结合。
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