elisa试剂盒参加pcr反应的物质主要有五种即引物、酶、dntp、模板和mg2+
引物:引物是pcr特异性反应的关键,pcr 产物的特异性取决于引物与模板dna互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板dna序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用pcr就可将模板dna在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 5-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至0kb的片段。
③引物碱基:g+c含量以40-60%为宜,g+c太少扩增效果不佳,g+c过多易出现非特异条带。atgc随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致pcr失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.~umol或0~00pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
转闸适用范围
samson萨姆森定位器的基本功能
日本thermo红外线加热原理及各种加热方式介绍
圣女果智能分选机的工作原理和技术支持以及作用概述
【YDHP-V-S2】
Elisa试剂盒PCR反应的五要素都是哪些?
施迈赛EX-AZM 170-02ZRK 24VAC/DC-3G/D电磁安全锁产品优点
对于精密微孔过滤机的保养,需要注意哪些要点?
哈威多路阀的行业应用
《广东省新污染物治理专家委员会工作规则(试行)》印发(附新污染物治理专家委员会委员名单)!
日立全自动氨基酸分析仪测定生物胺
液压切角机的结构性能早知道
关于材料拉伸性能试验机如何校准?
激光切割机多少钱?
一体化污泥压泥机运行中出现故障要怎么处理
SQ12SA3随车吊
铝合金防爆磁力启动器的产品特点和适用范围
口罩包装残氧检测仪
ATI气溶胶光度计有哪些优势
简述高低温湿热试验箱常见故障和排除方法