紫外分光光度法测定紫云英蜜中总酚的含量
目的：建立紫云英蜜中总酚含量测定方法。方法：采用folin酚法，样品经福林试剂显色反应后，紫外可见分光光度计测定其总酚含量。结果：总酚在2.03～8.04μg·ml-1内线性良好，r=0.9997，且平均回收率为102.42%，rsd=2.64%（n=5）。结论：该方法准确，简便，重现性好，专属性强，可有效地控制紫云英蜜的质量。
【关键词】肖公蜜总酚folin酚法紫外分光光度法
abstractobjective：toestablishauvmethodfordeterminationofthecontentoftotalhydroxybenzeneforziyunyingmi.method：folindeniswasadoptedofdeterminingthecontentoftotalhydroxybenzenebyuv.result：thetotalhydroxybenzeneshowedagoodlinearrelationshipat2.03～8.04μg·ml-1，r=0.9997，theaveragerecoverywas102.42%,rsd=2.64%（n=5）.conclusions：themethodisaccurateandsimplewithgoodreproducibility,andcancontrolthequalityofthispreparationeffectively.
keywordsziyunyingmi；totalhydroxybenzene；folindenis；uv
紫云英蜜又名红花草蜜或草子蜜，具有大自然清新宜人的草香味，甜而不腻，鲜洁清甜，色泽为浅琥珀色。富含多糖、多酚、氨基酸、维生素、微量元素等多种营养成分，长期饮用可补气血，健脾胃，增强抗病能力，强身健体。且其中的多酚酸具有抗病原微生物、抗炎症、抗变态反应、抗心血管疾病和抗氧化等作用［1，2］。为了控制产品质量，我们采用folin酚法对贵州不同产地的紫云英蜜中总多酚含量进行了研究。
1仪器与试药
1.1仪器
紫外可见分光光度计（岛津2401）;超声波清洗仪（昆山市超声仪器有限公司kq2508型）;恒温水浴锅（余姚市亚星仪器仪表有限公司）。
1.2试药
原儿茶酸对照品（批号：110809200503）；钨酸钠，磷钼酸，85%磷酸，na2co3，以上试剂均为分析纯；水为蒸馏水；
1.3福林试剂的配制［3］：
称取钨酸钠40g，磷钼酸8g和85%磷酸20ml，溶于300ml蒸馏水，煮沸加热回流2h，冷却，稀释至400ml，置于棕色瓶中保存。
1.4na2co3溶液的配制
称取15gna2co3，溶于200ml蒸馏水中，即为75g·l-1na2co3溶液。
2方法与结果
2.1对照品溶液的制备
原儿茶酸对照品的配制：称取原儿茶酸对照品15.80mg于50ml容量瓶中，蒸馏水溶解并定容，摇匀，备用，浓度为316μg·ml-1。
2.2供试品溶液的制备
取同一批样品，精密称定，置于50ml容量瓶中，超声使溶，过滤，取20ml续滤液定容成50ml，摇匀，备用。
2.3测定方法
精密吸取适量样品溶液1ml于10ml带塞离心管中，加入2.5ml福林试剂，放置5min，再精密加入na2co3溶液2ml，50℃水浴保持5min，再取出室温放置2h，于760nm左右测定吸光度值。
2.4标准曲线的制备
从原儿茶酸标准储备液中分别吸取1，1.5，2，2.5，3，3.5ml于25ml容量瓶中，蒸馏水稀释定容，摇匀，浓度分别为12.64μg·ml-1，18.96μg·ml-1，25.28μg·ml-1，31.60μg·ml-1，37.92μg·ml-1，44.24μg·ml-1，分别从中精密吸取1ml，按2.3测定方法反应，测定吸光度值。以终浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，得回归方程为y=0.0932x-0.0315，r=0.9997。结果表明总酚在12.64μg·ml-1～44.24μg·ml-1范围内线性良好。
2.5精密度试验
取同一份对照品按上述反应后连续测定5次，吸光度值rsd=0.386%。结果表明仪器精密度良好。
2.6样品吸光度值稳定性试验
按2.2供试品溶液制备方法制备样品液，并按2.3测定方法反应后，每隔5min测定一次，观察吸光度值变化，结果1h内的吸光度值rsd=1.42%，结果见图1。结果表明样品显色后在1h内较稳定。
2.7重现性试验
取同一批样品，平行5份，精密称定，按供试品溶液法制备，并按2.3测定法反应。结果表明，样品的平均含量为2.154mg·g-1，rsd=3.43%。结果表明方法重现性良好。
2.8加样回收率试验
取同一批样品，精密称定，精密加入337μg·ml-1原儿茶酸对照品2ml，按供试品溶液法操作，并按2.3测定样品中总酚的含量，结果表明，其回收率为102.42%，rsd=2.64%，数据见表1。表1总酚加样回收率试验结果（、略）
2.9样品含量测定
分别精密称取贵州不同产地的样品，每批平行取5份，按2.3测定方法操作，测定每批样品中总酚平均含量。结果见表2。表2不同批次样品总酚含量（略）
3讨论
植物多酚的测定方法有多种［3，4］，曾考察普鲁士蓝法［5］、重氮比色法［6］等，均因为方法显色不稳定或方法步骤复杂而未采用。而folin酚法实验操作较简单，且结果稳定可靠，故选用该方法作为紫云英蜜中总酚含量测定方法。
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abstractobjective：toestablishauvmethodfordeterminationofthecontentoftotalhydroxybenzeneforziyunyingmi.method：folindeniswasadoptedofdeterminingthecontentoftotalhydroxybenzenebyuv.result：thetotalhydroxybenzeneshowedagoodlinearrelationshipat2.03～8.04μg·ml-1，r=0.9997，theaveragerecoverywas102.42%,rsd=2.64%（n=5）.conclusions：themethodisaccurateandsimplewithgoodreproducibility,andcancontrolthequalityofthispreparationeffectively.
keywordsziyunyingmi；totalhydroxybenzene；folindenis；uv
紫云英蜜又名红花草蜜或草子蜜，具有大自然清新宜人的草香味，甜而不腻，鲜洁清甜，色泽为浅琥珀色。富含多糖、多酚、氨基酸、维生素、微量元素等多种营养成分，长期饮用可补气血，健脾胃，增强抗病能力，强身健体。且其中的多酚酸具有抗病原微生物、抗炎症、抗变态反应、抗心血管疾病和抗氧化等作用［1，2］。为了控制产品质量，我们采用folin酚法对贵州不同产地的紫云英蜜中总多酚含量进行了研究。
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1.1仪器
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1.2试药
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1.3福林试剂的配制［3］：
称取钨酸钠40g，磷钼酸8g和85%磷酸20ml，溶于300ml蒸馏水，煮沸加热回流2h，冷却，稀释至400ml，置于棕色瓶中保存。
1.4na2co3溶液的配制
称取15gna2co3，溶于200ml蒸馏水中，即为75g·l-1na2co3溶液。
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2.1对照品溶液的制备
原儿茶酸对照品的配制：称取原儿茶酸对照品15.80mg于50ml容量瓶中，蒸馏水溶解并定容，摇匀，备用，浓度为316μg·ml-1。
2.2供试品溶液的制备
取同一批样品，精密称定，置于50ml容量瓶中，超声使溶，过滤，取20ml续滤液定容成50ml，摇匀，备用。
2.3测定方法
精密吸取适量样品溶液1ml于10ml带塞离心管中，加入2.5ml福林试剂，放置5min，再精密加入na2co3溶液2ml，50℃水浴保持5min，再取出室温放置2h，于760nm左右测定吸光度值。
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取同一批样品，平行5份，精密称定，按供试品溶液法制备，并按2.3测定法反应。结果表明，样品的平均含量为2.154mg·g-1，rsd=3.43%。结果表明方法重现性良好。
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