超氧阴离子清除能力检测 说明 技术文章
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超氧阴离子清除能力检测试剂盒商品货号：ms1518
英文名称：superoxide anion scavenging capacity assay kit
别名：超氧阴离子清除能力试剂盒 超氧阴离子清除能力测试盒
检测方法：微量法
商品货号：商品品牌：规格基本售价选择规格
ms1518 -100管/96样 索桥生物 100管/96样 ￥960.00元
产品详细介绍
测定意义：
超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基，可攻击生物大分子，如脂质、蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等，使其交链或者断裂，引起细胞结构和功能的破坏，与机体衰老和病变有很密切的关系，清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。
测定原理：
ap-temed系统产生超氧阴离子，与盐酸羟胺反应生成no2－，no2－与对氨基苯磺酸和α－萘胺的作用生成红色的偶氮化合物，在530nm处有特征吸收峰，样品对超氧阴离子的清除能力与530nm的吸光值呈负相关。
产品说明书货号：ms1518 规格：100 管/96 样
超氧阴离子清除能力试剂盒说明书 微量法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
超氧阴离子自由基作为生物体代谢过程中产生的一种自由基，可攻击生物大分子，如脂质、 蛋白质、核酸和聚不饱和脂肪酸等，使其交链或者断裂，引起细胞结构和功能的破坏，与机体 衰老和病变有很密切的关系，清除超氧阴离子自由基的研究已经得到了广泛的关注。
测定原理：
ap-temed 系统产生超氧阴离子，与盐酸羟胺反应生成 no2－，no2－与对氨基苯磺酸和 α － 萘胺的作用生成红色的偶氮化合物，在 530nm 处有特征吸收峰，样品对超氧阴离子的清除能力 与 530nm 的吸光值呈负相关。
自备实验用品及仪器：
天平、研钵、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96 孔板、恒温水 浴锅。
试剂组成和配制：
提取液：液体 100ml×1 瓶，4℃保存。
试剂一：液体 1.5ml×1 支，4℃避光保存。
试剂二：粉剂×1 瓶，4℃避光保存。临用前加 6ml 蒸馏水充分溶解。
试剂三：液体 7.5ml×1 瓶，4℃保存。
试剂四：液体 7.5ml×1 瓶，4℃避光保存。
试剂五：液体 7.5ml×1 瓶，4℃避光保存。
样品处理：
1. 组织：按照质量（g）：提取液体积(ml)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g，加入 1ml 提 取液）加入提取液，冰浴匀浆后于 4℃，10000g 离心 10min，取上清置于冰上待测。
2. 细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（ml）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细 胞加入 1ml 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300w，超声 3 秒，间隔 7 秒，总时间 3min）； 然后 4℃，10000g 离心 10min，取上清置于冰上待测。
3. 培养液或其它液体：直接检测。
4. 粉剂药物可配制成相同浓度，比如 1mg/ml。
测定操作：
空白管 对照管 测定管
试剂一（μ l） 10 10 10
试剂二（μ l） 40 40
h2o（μ l） 65 25
充分混匀，25℃反应 1min
样品（μ l） 25
试剂三（μ l） 50 50 50
试剂四（μ l） 50 50 50
试剂五（μ l） 50 50 50
充分混匀，37℃显色 20min，于微量石英比色皿/96 孔板，以空白管调零，在 530nm 处测定对 照管和测定管的吸光值，分别记为 a 对照管和 a 测定管。
注意：空白管只需测定一次。
计算公式：
超氧阴离子清除率 i%= (a 对照管-a测定管) /a 对照管 x100%
注意事项：
1. 试剂一 4℃可保存 2 个月，配制好的试剂二 4℃可保存一周，建议实验前配制，并尽快使用。
2. 样品处理完后立即进行测定，或者低温保存不超过 24 小时。
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产品说明书
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