小鼠Smad7 elisa检测试剂盒操作步骤
小鼠smad7 elisa检测试剂盒操作步骤：
. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔0孔，在di一、第二孔中分别加标准品00μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取00μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为80 ng/l，20 ng/l ，60 ng/l，30 ng/，5 ng/l）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品0μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48t的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48t的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂a50μl，再加入显色剂b50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色5分钟.
0. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（od值）。 测定应在加终止液后5分钟。
人胃癌细胞；mkn-45
人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞；mum-2b
人侵袭性脉络膜黑色素瘤细胞；mum-2c
人肺粘液上皮样癌细胞；nci-h292
人低侵袭性脉络膜黑色素素瘤细胞；ocm-a
人胃腺癌细胞；sgc-790 [sgc790]
人低分化肺腺癌细胞；sk-lu-
人乳腺导管癌细胞；zr-75-30
人急性t淋巴细胞性白血病细胞；i 2.(crl-2572)
人膀胱癌细胞；5637（htb-9）
人肾透明细胞腺癌细胞；786-o [786-0]
人肾透明细胞癌；caki-
人胰腺导管癌细胞；cfpac-
人食管癌细胞；ec09
人结直肠腺癌细胞；hct-5 [hct5]
人结直肠腺癌细胞；ls 74t [ls74t]
人乳腺癌细胞；mda-mb-468
人肺支气管癌细胞；nci-h650
人非小细胞肺腺癌细胞；nci-h975
人非小细胞肺腺癌细胞；nci-h2087
人小细胞肺癌；nci-h2227
人非小细胞肺癌细胞；nci-h23
人肾上腺皮质腺癌细胞；nci-h295r
小鼠源细胞
小鼠胚胎成纤维细胞；3t3-swiss albino
小鼠t淋巴细胞瘤细胞；cyc-tag(s49)
小鼠骨髓细胞；fdc-p
小鼠垂体瘤细胞；gt-
小鼠胚胎成骨细胞前体细胞；mc3t3-e
小鼠胚胎成纤维细胞；nih/3t3
小鼠睾丸畸胎瘤细胞；p9
小鼠胚胎成纤维细胞(来自nih3t3)；pa2
小鼠血细胞；wehi-3 [wehi3]
小鼠成纤维细胞；φ2
小鼠红白血病细胞；mel
小鼠骨髓瘤细胞；sp2/0-ag4
小鼠垂体瘤细胞(分泌促生长激素分泌激素)；att-20
小鼠小胶质细胞；bv2
小鼠骨髓瘤细胞；fox-ny
小鼠胚胎成纤维细胞；mef
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. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔0孔，在di一、第二孔中分别加标准品00μl，然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从di一孔、第二孔中各取00μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为80 ng/l，20 ng/l ，60 ng/l，30 ng/，5 ng/l）。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品0μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48t的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48t的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。
6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂a50μl，再加入显色剂b50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色5分钟.
0. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。
. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（od值）。 测定应在加终止液后5分钟。
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