实时荧光定量PCR实验时的注意事项
实时荧光定量pcr实验需要先制备混合反应液，大剂量包装的反应试剂，使用前进行分装，尽量减少试剂的反复冻融。建议所有样本要有三个重复。实验操作过程时需注意以下几点，有利于避免实验污染问题。1.用稀释的漂白剂或净化剂擦拭净化台。2.在的配有紫外灯超净式或者超静台中准备样品，理想的是样品的准备与pcr的扩增分开在不同的区域完成。3.在样品制备和配制反应过程中要勤换手头。4.勤用稀释的漂白剂擦拭移液器。5.只使用pcr级的水和pcr试剂进行pcr实验。5. 用带旋盖的 ep 管稀释和配制反应液。6. 在进行 pcr 实验时，还应准备一个无模板的对照来验证有无污染发生，而且用热启动酶防止反应开始之前的非特异性扩增。在选择适合做荧光定量pcr试剂冻干的冻干机时，,要具有完整的pat控制技术，可对冻干过程进行完整的控制和分析监控。包括预冻全过程控制、预冻结束判定、升华全过程控制、升华结束判定、解析全过程控制及冻干结束判定。板层温度均一度±1℃。系统极限真空度±1pa。系统真空泄露率＜3pa.l/s。外界干扰热量屏蔽。共晶点测试仪助力工艺开发。全进口配件。建议提高荧光pcr冻干的相关性。
型号 pilot3-6t pilot5-8t pilot7-12t pilot10-15t
冻干面积 0.42㎡ 0.56㎡ 0.84㎡ 1.05㎡
∅22西林瓶装量（20ml） ≥900支 ≥1170支 ≥1500支 ≥2100支
∅16西林瓶装量（5ml） ≥1700支 ≥2210支 ≥3100支 ≥4100支
冷阱温度（空载） -85℃
真空度（空载） ≤1pa
板层温度（空载） -55℃
板层制冷方式 硅油循环
板层数量 3+1 4+1 4+1 5+1
板层尺寸（mm） 350*400 350*400 350*600 350*600
捕水能力 6l 8l 12l 10l
冻干效率 3l/24h 5l/24h 7l/24h 10l/24h
板层间距 100mm 80mm 90mm 100mm
穿墙隔离 √ √ √ √
冻干曲线拟合度 100% 100% 100% 100%
晶型控制 √ √ √ √
蒸汽分压控制 √ √ √ √
升华结束判定 √ √ √ √
冻干终点测试 √ √ √ √
压塞 液压
整机尺寸 （约） w860*d1400*h1800 w860*d1400*h1800 w860*d1700*h1900 w860*d1700*h1900
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穿墙隔离 √ √ √ √
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升华结束判定 √ √ √ √
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