土壤高速冷冻离心机在土壤DNA提取中的应用

使用土壤高速冷冻离心机的所有转头都具有转头自锁功能,能够轻松装卸,同时所有转头都能够高温高压灭菌,保障了使用者的安全性。
土壤高速冷冻离心机具体提取土壤dna的步骤:
一、土壤样本预处理:
1、取500mg土壤样本至研磨管中。
2、加入980µl缓冲液,轻柔涡旋混匀。
3、加入120μl裂解液。
4、将研磨管置于研磨仪中,40hz处理40sec。
5、12000rpm离心5min,沉淀碎片颗粒。
6、转移上清液至2ml离心管中。加入250μl去蛋白液,手动摇晃混匀。4℃放置5min。
7、12000rpm离心3min,之后取不多于900μl上清液,转移至2ml离心管中。
8、加入1/3体积的结合液,轻柔涡旋混匀。4℃放置5min。
9、12000rpm室温离心1min。转移上清液至5ml离心管中。
10、加入1.5倍体积的缓冲液,立即吹打混匀。
二、dna提取:
1、将dna吸附柱套入2ml收集管中,备用。
2、将预处理混合液加入到dna吸附柱中,12,000rpm室温离心1min,弃掉废液。
3、将dna吸附柱放回收集管,加入600µl漂洗液,12,000rpm室温离心30sec,弃废液。
4、重复一遍步骤3。
5、将dna吸附柱放回收集管,空柱12,000rpm离心2min,以除去残留的漂洗液。
6、将dna吸附柱放入新的洁净1.5ml离心管中,在滤膜加入30-100µl洗脱液,室温放置3min。然后12,000rpm离心1min,收集滤液即为样本dna。
7、dna样品可置于-20℃短期保存,-80℃长期保存。
关键词:冷冻离心机 离心机 研磨仪

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