人胱抑素c试剂盒正确操作!
产品名称:人胱抑素c试剂盒
规格:48t/96t
储存:2-8℃,避光保存
有效期:6个月
本产品仅供科研实验用,不做其它用途!
检测原理:试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(elisa)。往预先 包被人胱抑素c(cys-c)捕获抗体的包被微孔中,依次加入标本、 标准品、hrp标记的检测抗体,经过温育并*洗涤。用底物tmb 显色,tmb在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转 化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的人胱抑素c(cys-c)呈正 相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(od 值),计算样品 浓度。
实验步骤(仅供参考):
1. 使用前,将所有试剂充混匀。不要使液体产生大量的泡沫,以免加样时加入大量的气泡,产生加样的误差。
2. 根据待测样品数量加标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定,能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后加入50ul于反应孔内。
3. 加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗t。盖膜板,轻轻振荡混匀,37℃温育1小时。
4. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
5. 每孔加入80ul的亲和链酶素-hrp,轻轻振荡混匀,37℃温育30钟。
6. 甩去孔内液体,每孔加满洗涤液,振荡30秒,甩去洗涤液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤,洗涤次数增加一次。
7. 每孔加入底物a、b各50ul,轻轻振荡混匀,37℃温育10钟。避免光照。
8. 取出酶标板,迅速加入50ul终止液,加入终止液后应立即测定结果。
9. 在450nm波长处测定各孔的od值。
关键词:酶标仪 洗板机
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