赫施曼助力人尿中12种典型个人护理品的测定
个人护理品(pcps)主要包括防腐剂、紫外吸收剂、抗菌剂、芳香剂等，广泛应用于口红、防晒霜和洗涤剂等日用产品中，其可随产品应用进入到环境介质中，如地表水、地下水、土壤、大气等。
pcps的广泛、大量使用及其在环境中的普遍存在导致该类物质在人体内的长周期暴露。流行病学结果提示，过敏、哮喘等免疫系统疾病和乳腺癌、子宫内膜异位症等生殖系统疾病可能与pcps暴露相关。
人群生物监测可以准确地反映人群暴露水平与特征，成为开展环境污染物健康影响研究的“金标准”。其方法选用的是超高效液相色谱-串联质谱法同时测定人尿中12种典型个人护理品(pcps)，其中包括5种对羟基苯甲酸酯类防腐剂(pbs)、5种二苯酮类紫外吸收剂(bps)和2种抗菌剂。
该方法涉及溶液配置和样品前处理，内容如下：
1.溶液配制
乙酸铵-酶缓冲溶液：用miragen电动移液器准确移取235μlβ-葡萄糖醛酸酶溶于20ml乙酸铵缓冲溶液(ph=5.0)。
混合标准溶液：准确移取质量浓度为1mg/ml的各分析物单标储备液，用miragen电动移液器取各分析物单标储备液1ml于100ml容量瓶中，以甲醛定容至刻度，得到10μg/ml混合标准溶液(mep和bp-3为40mg/l)。混合稳定同位素内标储备液：按上述相同方法配制混合内标储备液，质量浓度均为0.5mg/l，4℃冰箱保存。使用时将混合内标储备液用甲醇稀释至0.1mg/l，配制成混合内标工作液。
标准工作溶液配制：准备4个20ml容量瓶，4个500ml容量瓶，采用opus电子瓶口分配器（10ml款）的stepper模式，设置2组分液体积，di一组4.00、2.00、1.00、0.50ml，第二组5.00、2.50、1.25、0.50ml，然后排气泡进行分液。将di一组4个体积的混合标准溶液（10μg/ml）分别加入4个20ml容量瓶中，将第二组4个体积的混合标准溶液（10μg/ml）分别加入4个500ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，得到相对应的2000、1000、500、250、100、50、25、10μg/l系列标准溶液(mep和bp-3为8000、4000、2000、1000、400、200、100、40μg/l)。
再用miragen电动移液器分别加入50μl系列标准溶液、75μl混合内标工作液和375μl乙腈-水(20∶80，v/v)，最终配制为200、100、50、25、10、5、2.5、1μg/l的标准工作溶液(mep和bp-3为800、400、200、100、40、20、10、4μg/l)。
2.样品前处理
准确移取1ml尿液到5ml聚丙烯离心管中。用miragen电动移液器依次加入500μl乙酸铵-酶缓冲溶液(酶活力相当于500units/ml)和75μl混合内标工作液(内标使用量相当于7.5ng)。
充分混匀后在37℃下水浴酶解过夜(≥16h)。酶解结束后取出样品降至室温，在4500r/min条件下离心10min，取上清液进行固相萃取。依次用3ml甲醇和3ml水活化oasishlb固相萃取小柱，将上清液转移至固相萃取柱，在不加压力的条件下依靠自然重力过柱。
样本过柱后，用2ml乙腈-水(25∶75，v/v)快速淋洗，空气抽干3~5min。4ml甲醇溶液分2次缓慢洗脱，氮气吹至近干，500μl乙腈-水(20∶80，v/v)复溶，充分涡旋混匀后过滤膜上机测定。
编制标准曲线的工作常与气相色谱类、液相色谱类、原子吸收分光光度计、原子荧光光度计、icp-ms等大型分析设备相伴，需配置的标准溶液也较多，工作量较大。
实验室移取几微升到几毫升的液体，一般采用移液器。miragen电动移液器，数值靠设定或选定，电机控制活塞运动。而且吸液和排液可分次数且各段体积可调，分液程序可储存，可实现单吸多排、多吸单排等效果，有步骤少、更稳定、调数快、模式多等诸多优势。
赫施曼opus电子瓶口分配器精度可达万级，一次装液可完成相同（如分10次，每次5.00ml）或不同体积的连续分液（如分5次，体积分别为1.00、2.00、3.00、4.00、5.00ml，每个体积均独立可调），单次分液量最小10μl，最多500ml，搭配miragen电动移液器，非常适合做标准曲线，同时也适用各种需要分液的实验室、生产线，应用广泛。
（实验出自：韩林学,张续,胡小键,张海婧,邱天,林潇,朱英.超高效液相色谱-串联质谱法测定人尿中12种典型个人护理品.色谱, 2023, 41(4): 312-322 doi:10.3724/sp.j.1123.2022.05032）
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