精品推荐 | 从RNA到cDNA-翌圣5分钟反转录系列产品快速出圈!

精品推荐 | 从rna到cdna-翌圣5分钟反转录系列产品快速出圈!
反转录是将rna转录成互补dna (cdna) 的过程,该反应由反转录酶介导完成。在有退火引物的情况下,反转录酶首先与 rna 模板结合。反转酶的rna依赖性 dna 聚合酶活性通过掺入反应混合物中的dntp来合成cdna,反应生成得到 cdna:rna 杂合链,此过程被称为第一链 cdna 合成。
莫洛尼鼠白血病病毒 (m-mlv) 反转录酶是分子生物学实验流程中常见的反转录酶之一。为了获得更高的反转录效率、更好的热稳定性和更高的 cdna 合成率,通常会对原始的反转录酶进行基因工程改造。目前市面上的反转录试剂所需要的反转录时间普遍从15分钟到30分钟不等,时间相对较长,当反应样本量较大时,整体花费时间量也会急剧上升。翌圣生物现有的5分钟反转录系列产品,在5分钟内即可完成反转录,省时高效。
精品推荐一5分钟一步消化&反转录预混液(cat #11151es)
产品特点
一步完成:一步完成gdna去除和反转录;
快速反应:消化&反转仅需5分钟;
高效合成:可保证100 pg rna反转录;
产物稳定:cdna产物可长久稳定保存;
性能展示
反转录产量高
图. 以人293t细胞rna为模板,分别检测三种基因。品牌a、品牌b、品牌c均为一步gdna去除&反转录试剂。测试结果显示,在1 μg和10 ng total rna 投入下,11151es反转录的产量均优于其他品牌,ct值更小。
图. 以拟南芥rna为模板,品牌a、品牌b、品牌c均为一步gdna去除&反转录试剂。测试结果显示,在1 μg和10 ng total rna 投入下,11151es反转录的产量均优于其他品牌,ct值更小。
优异的灵敏度
图. 以人293t细胞rna为模板,扩增30%gc、50%gc、60%gc和70%gc的基因。分别投入100 pg、1 ng、10 ng、100 ng、1 μg的total rna进行反转录并进行荧光定量检测。结果显示,11151es可满足100 pg-1 μg rna的反转录。
cdna产物稳定性好
图.以人293t细胞rna为模板进行反转录,将获得的cdna产物进行反复冻融,分别冻融10次、20次、30次。测试结果显示11151es反转录得到的cdna产物在30次反复冻融处理后,仍保持高度的稳定性,ct值差异不大。
图. 以人293t细胞rna为模板进行反转录,将获得的cdna产物在-20℃、4℃、25℃和37℃的温度条件下放置7天。测试结果显示11151es反转录得到的cdna产物在不同温度下存储7天,仍保持高度的稳定性,ct值差异不大。
客户用户体验
样本来源:人肝脏组织总rna
样本来源:胃黏膜细胞rna
样本来源:小鼠胰岛素瘤细胞rna
精品推荐二5分钟快速反转录试剂盒(11149/11150es)
产品特点
快速反转:最快5分钟左右即可完成第一链cdna合成;
检出率高:10 pg-1 ug的rna检出率;
高效合成:合成效率媲美进口,最长可合成14kb大小的片段;
适用广泛:可用于下游pcr或qpcr;
示踪便利:示踪版包含无干扰、可视化蓝色示踪染料,提醒加样进度。
性能展示
快速反转录
反转录时间
平均ct值
5min
21.693
10 min
21.589
15 min
21.604
20 min
21.746
25 min
21.756
30 min
21.691
图. 以293t细胞总rna为模板,使用11149es进行反转录,得到的cdna 进行qpcr 定量分析。结果显示,不同反转录时间处理的ct值差值在0.2之内。说明产品可在5分钟内完成反转录,反转效果和长时间反转效果持平。
灵敏度高,可至10 pg
图. 以293t细胞总rna为模板,使用11149es进行反转录,得到的cdna 进行qpcr 定量分析。结果显示,rna 投入量为10 pg-1 μg时,11149es均可反转成功,保证定量结果。
扩增性能好,最长扩增14 kb片段
图. 以293t细胞总rna为模板,使用11149es进行反转录,将得到的cdna进行pcr检测。结果显示,11149es能够满足合成1 kb-14 kb长度的cdna, 后续pcr有一定的适用场景。若需要直接反转出10kb以上的片段,建议延长反转录时间至20-30分钟,以保证最终片段的获取。
反转录效率比对
rna投入量
ct值
11149es
进口a品牌
1 μg
15.2
15.5
100 ng
18.0
18.5
10 ng
21
21.7
1 ng
24.5
25.1
100 pg
29.1
29.7
10 pg
32.7
34.3
图. 以293t细胞总rna为模板,使用11149es、进口a品牌进行反转录,其中11149es不进行gdna去除步骤,将得到的cdna 进行qpcr 定量分析。结果显示,进口a品牌反转时间为13分钟, 11149es反转时间为5分钟,不同产物定量显示,11149es的ct更小或者接近进口竞品,说明11149es 5分钟反转效率优于或近似进口a品牌的反转录效率。
rna投入量
ct值
11149es
进口b品牌
1 μg
16.2
17.4
100 ng
19.0
20.5
10 ng
22
23.8
1 ng
26
27.9
100 pg
31.4
33.2
10 pg
32.9
35.6
图. 以293t细胞总rna为模板,使用11149es、进口b品牌进行逆转录,其中11149es不进行gdna去除步骤,得到的cdna 进行qpcr 定量分析。结果显示,进口b品牌反转时间为20分钟,11149es反转时间为5分钟,不同量底物定量显示,11149es的ct更小或者接近进口b品牌,说明11149es 5分钟反转效率优于或近似进口b品牌的反转录效率。
客户体验反馈
样本来源:菊花叶片
客户评价:与某进口品牌效果相似,扩增常规大小的片段效果不错。
样本来源:果*叶片
客户评价:蓝色很好看。
样本来源:水稻
客户评价:与其他反转录试剂盒相比,节省加样时间,节省反转录反应时间(其他试剂盒需要15+2 min,本试剂盒只需5 min),后续基因克隆dna电泳结果证明,本试剂盒反转效率更高,条带更亮,所以会更节省pcr使用试剂,节省成本。
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分类
产品名称
货号
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5 分钟快速反转,最长可满足14 kb cdna合成,含gdna去除(下游应用pcr/qpcr)-常规版
hifair®advancefast 1st strand cdna synthesis kit(no dye)
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