细胞培养注意事项
一、细胞复苏
将冻存细胞从液氮中取出后，在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移人15ml离心管中，加入10ml预热的dmem*培养基，轻轻吹匀，离心，2000rpmx2min，弃上清液。
二、细胞传代
加入10ml pbs清洗细胞培养盘，转移至15ml离心管，2000rpmx2min，弃上清液。再加入10ml pbs（经高压灭菌，保存于40c），吹匀，吸取10微升进行计数，按照1×106/盘接种，在含5%co2的细胞培养箱继续培养。
细胞密度达到80%～90%时，去培养基，10ml pbs清洗2次。放人细胞培养箱3min。转移至15ml离心管。加入10ml pbs清洗细胞培养盘，转移至15ml离心管，2000rpmx2min，弃上清液。
冻存液的配制：70%的*培养基+20%fbs+10%dmso.dmso要慢慢滴加，边滴边摇。
1.进入细胞间开始细胞培养时，必须严格按照下列步骤操作：
2.确定衣服的袖口已经卷起或者白大褂的袖口已经扎紧。
3.确定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。为了方便单手开启瓶盖，实验开始前可以把所有瓶盖旋松。
4.操作时如果不能肯定所用的耗材是洁净的，必须及时更换。
上海纪宁实业有限公司位于中国*大城市——中华人民共和国直辖市之一的上海，已发展成集科研、生产、销售为一体的创新性企业。公司专注于生物、生化领域产品销售，主要经营的有elisa试剂盒、生化试剂、抗体、标准品、对照品、细胞、血清、培养基等生化产品。
关键词：水浴锅 细胞培养箱 培养箱
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加入10ml pbs清洗细胞培养盘，转移至15ml离心管，2000rpmx2min，弃上清液。再加入10ml pbs（经高压灭菌，保存于40c），吹匀，吸取10微升进行计数，按照1×106/盘接种，在含5%co2的细胞培养箱继续培养。
细胞密度达到80%～90%时，去培养基，10ml pbs清洗2次。放人细胞培养箱3min。转移至15ml离心管。加入10ml pbs清洗细胞培养盘，转移至15ml离心管，2000rpmx2min，弃上清液。
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1.进入细胞间开始细胞培养时，必须严格按照下列步骤操作：
2.确定衣服的袖口已经卷起或者白大褂的袖口已经扎紧。
3.确定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。为了方便单手开启瓶盖，实验开始前可以把所有瓶盖旋松。
4.操作时如果不能肯定所用的耗材是洁净的，必须及时更换。
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