培养基体系主要成分及功能介绍

1、葡萄糖:用于细胞能量代谢。
2、co₂:细胞需要少量的二氧化碳来维持生长。
在培养基中,溶解的co₂与碳酸氢盐离子处于平衡状态,许多培养基利用了这种co₂/碳酸氢盐反应来缓冲培养基的ph值。co₂溶解在培养基中,与水反应生成碳酸。随着细胞代谢产生更多的co₂,随着下面的化学反应向右驱动,介质的ph值下降,通过向培养基中添加碳酸氢钠,可使ph值维持在7.2 ~ 7.4的最佳范围。
3、酚红:用于监测培养基的ph值。
在细胞生长过程中,由于细胞释放的代谢物改变了ph值,培养基的颜色也随之改变。在较低的ph值下,酚红会变成中黄色,而在较高的ph值下,它会变成中紫色。对于大多数培养体系(ph为7.2 ~ 7.4),培养基应为鲜红色。(部分特殊培养基不添加酚红,例如对雌激素敏感的乳腺组织细胞,酚红会发挥跟类固醇相似的功能从而影响细胞。)
4、l-谷氨酰胺:
几乎是所有哺乳动物和昆虫细胞所必需的氨基酸,用于合成蛋白质,参与核酸代谢。它相比其他氨基酸更不稳定,容易降解,降解的速率和程度与储存温度、时间和ph值有关。
5、非必需氨基酸neaa:
所有的培养基配方都含有10种必需氨基酸以及半胱氨酸、谷氨酰胺和酪氨酸。在一些培养基中还需要加入其他非必需氨基酸(丙氨酸、天冬酰胺、天冬氨酸、甘氨酸、谷氨酸、脯氨酸和丝氨酸)可以减少细胞的代谢负担,从而增加细胞增殖。
6、丙酮酸钠:
丙酮酸是糖酵解过程中的中间有机酸代谢物,可以轻易地进出细胞,可以为合成代谢过程提供能量来源和碳骨架。大多数培养基中丙酮酸钠的最终浓度为1mm,但在l-15培养基中增加到5mm,方便在无co2环境中使用。

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