当我们在养细胞的时候,有可能会出现如下的状况:
细胞生长缓慢
细胞变形
碎片增加
悬浮细胞容易成团
培养基提前变色
镜下发现有小黑点
如果排除了其他试剂选择不当、细胞株老化、细菌污染……原因,而仍有上述一种或几种情况,则高度提示:细胞可能出现了支原体污染。据报道,细胞培养中发生支原体污染的机率较高,会达到70%左右,常规抗生素的使用对支原体几乎无效。
那么,支原体污染,对细胞培养有什么危害呢?
支原体穿透真核细胞表面 大量支原体聚集在真核细胞表面(扫描电镜照片)
细胞被支原体污染,解决方案
方法一:确认细胞已被支原体污染,终止试验,丢弃所有被污染的细胞和耗材。
重新复苏细胞,注意选用未被污染的细胞株、血清和培养基,并规范操作。
方法二:对于珍贵的,样品不可再得的细胞,或价格昂贵的种子细胞,不但无法丢弃,而且作为种子细胞,还需要**支原体污染。
此时,需选用特异性的支原体杀除剂,清除污染,保护细胞。
目前世界上有效的方法是是德国的一款生物试剂,由minerva公司生产,品名mynox®。
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