岛津LC-2010A HPLC操作流程规范
1、目的规范型液相色谱仪的使用。2、范围适用于岛津lc-2010a型液相色谱仪的使用。3、规程3.1系统组成本系统由容器箱、自动进样器、检测部、输液部、柱温箱、系统控制器、easy3000工作站和电脑等组成。3.2准备3.2.1准备所需的流动相，用合适的0.45μm滤膜过滤，超声脱气至少20min。3.2.2根据待检样品的需要更换合适的洗脱柱（注意方向）。3.2.3配制样品和标准溶液（也可在平衡系统时配制），用0.45μm滤膜过滤。3.2.4检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。3.3开机f2接通电源，按下系统控制器面板上的电源开关上托画面上显示要输入loginpass-id-no的对话框，输入00000后，按[ok]显示menu画面，选择method画面，在method画面进行相关参数设定，然后打开电脑显示器、主机，zui后打开色谱工作站。3.4参数设定3.4.1波长设定在method画面上，将光标置于uv-vis检测器波长设定的栏内，用数字键输入所需波长值，按[enter]键确认。3.4.2流速设定在method画面上，将光标置于流量设定的栏内，用数字键输入所需的流量（柱在线时流量一般不超过1ml/min），按[enter]键确认。3.4.3流动相比例设定在method画面上，将光标置于流动相混合比率设定的栏内，在a-d上，用数字键输入所需流动相的混合比率，按[enter]键确认。3.4.1柱温设定在method画面上，将光标置于柱温箱温度设定栏，用数字键输入柱温箱所需的温度，按[enter]键确认。3.5更换流动相并排气泡3.5.1将管路的吸滤器放入装有准备好的流动相的储液瓶中；3.5.2逆时针转动泵的排液阀180°，打开排液阀；3.5.3在method画面上，按[purge]键显示清洗设定的上托画面，pump键旁的绿指示灯亮，*开始工作。3.5.4依次按下使用的流动相通道和冲洗液通道的功能键，即流路a、流路b、流路c、流路d及自动进样的冲洗液，泵大约以8ml/min的流速冲洗，清洗完成后自动停止。3.5.5将排液阀顺时针旋转到底，关闭排液阀。3.5.6如管路中仍有气泡，则重复以上操作直至气泡排尽。3.5.7如按以上方法不能排尽气泡，从柱入口处拆下连接管，放入废液瓶中，设流速为5ml/min，按[pump]键，冲洗3min后再按[pump]键停泵，重新接上柱并将流速重设为规定值。3.6平衡系统3.6.1按《easy3000色谱数据工作站操作规程》打开“easy3000色谱工作站”软件，输入实验信息并设定各项方法参数后，等待系统平衡。3.6.2等度洗脱方式3.6.2.1按泵的[pump]键，泵启动，pump指示灯亮。用检验方法规定的流动相冲洗系统，一般zui少需6倍柱体积（约30min）的流动相。3.6.2.2检查各管路连接处是否漏液，如漏液应予以排除。3.6.2.3观察泵控制屏幕上的压力值，压力波动应不超过1mpa。如超过则可初步判断为柱前管路仍有气泡，按3.5.6操作。3.6.2.4观察基线变化。如果冲洗至基线漂移<0.01mv/min，噪声为<0.001mv时，可认为系统已达到平衡状态，可以进样。3.6.3梯度洗脱方式3.6.3.1以检验方法规定的梯度初始条件，按3.6.2项下方法平衡系统。3.6.3.2在进样前运行1~2次空白梯度。方法：具体操作详见lc-2010a操作说明书34页3.4.6梯度洗脱的设定。3.7进样3.7.1进样前按检测器[zero]键调零，按软件中[零点校正]按钮校正基线零点。3.7.2按下系统控制器面板上的run键，系统自动进样。3.8清洗柱及进样系统和关机3.8.1数据采集完毕后，关闭检测器，继续以工作流动相冲洗20min后，（如流动相含缓冲盐，换为不含缓冲盐的同比例流动相在冲洗20min），再换用纯水冲洗系统及色谱柱至少60min，zui后用甲醇或乙腈冲洗至少30min。3.8.2冲洗完柱后，将整个流路都置于有机溶剂中，按3.5.4清洗整个流路及进样系统。3.8.3清洗完成后，先将流量降到0，关闭电源开关。3.8.4每次实验完毕，均需更换循环瓶中的水。3.8.5认真填写仪器使用记录。
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