高效缩短时长，确保质量！Onepot mRNA Transcription工艺全新升级！
近年来，mrna技术的发展应用持续得到关注。mrna药物是通过将编码抗原蛋白的mrna接种到人体，利用人体细胞内的遗传物质进行表达合成抗原蛋白，通过抗原蛋白诱导和激活机体的免疫系统产生免疫反应，从而达到预防和治疗疾病的目的。mrna药物以安全、高效、周期短等的优势，能够同时诱导产生体液免疫和细胞免疫，目前已经应用在肿瘤、传染病、罕见病、心血管疾病等多种不同适应症。
※图片来源于沙利文
mrna药物开发的整个流程大致可以分为几步：
序列确定&设计—mrna体外转录—包封制备
mrna体外转录（in vitro transcription, ivt）步骤：
质粒dna 提取&线性化—体外转录（共转录加帽）—纯化—mrna原液
目前现有的工艺大都是质粒dna在酶切后进行一步纯化，在进行ivt步骤。翌圣生物基于成熟的mrna 应用开发中心，开发出：“onepot mrna transcription” 工艺，环状质粒dna在酶切后不进行纯化，直接投料进行体外转录操作，也可以得到高质量的mrna原液产品。整个工艺在确保产品和工艺质量的前提下，减短了现有工艺的时长。
工艺优势
工艺优化，减少ivt步骤，操作更简单；物料成本降低，不需酶切后纯化物料以及质检；mrna质量&得率未降低。
数据展示
“
1、产量数据
本工艺分别使用了2k 、4k 和9k的片段，进行ivt，1μg的质粒投入，可以产生150-200μg的mrna，产量倍数高达近200。
*：20ul反应体系下的mrna产量
“
2、完整度检测
采用ce的方法分别对2k、4k 和9k的片段进行完整度检测，2k和4k的完整度>92%，9k的完整度>87%。
“
3、mrna加帽率检测
使用lc-ms对2k的序列进行加帽率检测，加帽率为99.5%。
上图：hplc 紫外色谱图
下图：解卷积分子量图谱
“
4、mrna加尾率检测
使用lc-ms对样品进行加尾率检测，检测结果显示成正态分布。
上图：液质检测 tic 图谱
下图：解卷积分子量图谱
“
5、mrna细胞活性检测
使用one-pot工艺和普通工艺合成的mrna产物转染293t细胞24h后，荧光表达无差异。
产品列表
流程 定位 产品名称 货号
体外转录（试剂盒） rna体外转录 hifair®t7 high yield rna synthesis kit 10623es
一步法mrna 体外转录 t7 high yield rna synthesis kit for co-transcription 10673es
体外转录（单组分） 限制性内切酶 bspqi gmp-grade (10 u/μl) 10664es
bsai gmp-grade (20 u/μl) 10661es
10×digestion buffer 3 gmp-grade 10667es
t7 rna 合成酶 t7 rna polymerase gmp-grade（250 u/μl） 10625es
无机焦磷酸酶 pyrophosphatase,inorganic gmp-grade(1 u/μl) 10620es
pyrophosphatase, inorganic gmp-grade (0.1 u/μl) 10672es
rna 抑制剂 murine rnase inhibitor gmp-grade (40 u/μl) 10621es
转录buffer 10×transcription buffer gmp-grade(mg2+free) 10669es
10× transcription buffer 2 gmp-grade 10670es
ntp atp tris solution gmp-grade (100 mm) 10652es
ctp tris solution gmp-grade (100 mm) 10653es
utp tris solution gmp-grade (100 mm) 10654es
gtp tris solution gmp-grade (100 mm) 10655es
pseudo utp tris solution gmp-grade (100 mm) 10656es
n1-me-pseudo utp tris solution gmp-grade (100 mm) 10657es
dna消化 模板dna 消化 deoxyribonuclease i (dnase i) gmp-grade 10611es
rna纯化 rna纯化 hieff ngs®rna cleaner 12602es
mrna修饰 二步法加帽技术 mrna vaccinia capping enzyme gmp-grade 10614es
mrna cap 2´-o-methyltransferase gmp-grade 10612es
10× capping buffer gmp-grade 10666es
murine rnase inhibitor gmp-grade (40 u/μl) 10621es
gtp tris solution gmp-grade (100 mm) 10655es
s-adenosylmethionine (sam)（32mm） 10619es
共转录帽类似物 cap1-gag m7(3'omeg)(5')ppp(5')(2'omea)pg (100mm) 10677es
cap1-gag m7g(5’)ppp(5’)(2’omea)pg(100 mm) 10678es
cap au-gaum7g(5')ppp(5')(2'omea)pu gmp-grade (100 mm) 10679es
加尾酶 e.coli poly(a) polymerase (5 u/μl） 14801es
mrna标准品 mrna原液标准品 firefly luciferase-mrna(3-o-me-gag, n1-me-pseudo utp) 17101es
egfp-mrna(3-o-me-gag, n1-me-pseudo utp) 17102es
ova -mrna(3-o-me-gag, n1-me-pseudo utp) 17103es
mcherry-mrna(3-o-me-gag, n1-me-pseudo utp) 17104es
环状rna 线性rna 去除 rnase r (20u/μl) 14606es
当弯头外侧受拉应力会发生什么状况呢？
ATP生物荧光检测技术
对于表面电阻测试仪的使用你做的正确吗？看这里！
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LUYOR-3130紫外线手电筒性能
电子级双氧水纯化工艺
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GCE氧气减压器天津现货
智能电磁阀控制装置可以实现全自动控制，不需要人工干预
滑托板在未来包装里的发展趋势
陶瓷渣浆泵有哪些优缺点
二氧化硫智能数字传感器助力空气质量监测
有机垃圾处理机对解决“垃圾分类”和“垃圾围城”问题起积极作用
如何选择罗托克执行机构
登封水浴锅HH-8 双列八孔
点焊机的机械使用
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mrna体外转录（in vitro transcription, ivt）步骤：
质粒dna 提取&线性化—体外转录（共转录加帽）—纯化—mrna原液
目前现有的工艺大都是质粒dna在酶切后进行一步纯化，在进行ivt步骤。翌圣生物基于成熟的mrna 应用开发中心，开发出：“onepot mrna transcription” 工艺，环状质粒dna在酶切后不进行纯化，直接投料进行体外转录操作，也可以得到高质量的mrna原液产品。整个工艺在确保产品和工艺质量的前提下，减短了现有工艺的时长。
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数据展示
“
1、产量数据
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*：20ul反应体系下的mrna产量
“
2、完整度检测
采用ce的方法分别对2k、4k 和9k的片段进行完整度检测，2k和4k的完整度>92%，9k的完整度>87%。
“
3、mrna加帽率检测
使用lc-ms对2k的序列进行加帽率检测，加帽率为99.5%。
上图：hplc 紫外色谱图
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4、mrna加尾率检测
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上图：液质检测 tic 图谱
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5、mrna细胞活性检测
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10×digestion buffer 3 gmp-grade 10667es
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ova -mrna(3-o-me-gag, n1-me-pseudo utp) 17103es
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环状rna 线性rna 去除 rnase r (20u/μl) 14606es
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