口腔癌动物模型的建立
口腔癌是发生于口腔黏膜的恶性肿瘤,绝大多数为鳞状细胞癌,包括发生于舌、颊、口底、唇、牙龈等黏膜的癌瘤。口腔癌发病率高,且侵润和转移出现较早,目前临床尚无好的治疗方法,因此口腔癌动物模型的研究一直受到重视。
4-硝基喹啉-n-氧化物（4-nitroquinolinen-oxide，4-nqo）是一种水溶性喹啉衍生物，能够通过氧化应激损伤和抑制dna合成等机制诱导鳞状细胞癌的产生。4-nqo诱导肿瘤的产生具有组织特异性，口服主要诱导口腔及上消化道系统肿瘤的形成，皮下注射主要诱导肺癌的形成。
图14-nqo分子结构
4-nqo诱导口腔癌建模步骤
动物：
4-nqo可以诱导大多数动物发生口腔癌，但是此类模型主要应用于啮齿类动物（如大鼠和小鼠）。
4-nqo的配置：
用无菌蒸馏水配成0.1%浓度, 置于4 ℃冰箱避光保存, 用时以自来水配成300 mg/l置于避光瓶内自由饮用。
造模方法：
1、实验组68只小鼠为例：300 mg/l 4-nqo饮水喂养8～20周, 后改用自来水喂养至40周, 实验第9～40周每2周随机处死4只；
2、对照组34只小鼠,自来水喂养,实验第9～40周每2周随机处死2只作为同期对照。
造模成功的指标：
1.肉眼观察：小鼠精神状况、活动度、进食、饮水量、饮药量及毛色情况,每周记录小鼠体质量,饮水量,饮药量。每周掰开小鼠口腔观察口腔内变化,记录口腔内黏膜色泽,质地等是否改变,是否有斑块、溃疡或肿物出现。
2.h&e染色观察：处死小鼠后立即取全舌、牙龈、口底、颊、腭、唇、颌下淋巴结、颌下腺、食管、胃、肝、脾、肺、肾、小肠、大肠等组织，进行h&e染色，做病理学观察。
3.免疫组化广谱细胞角蛋白(pan-ck)染色观察，pan-ck兔抗鼠多克隆抗体在癌细胞内为阳性反应。
应用案例
图2小鼠口腔癌颌下淋巴结转移大体及组织病理学观察（引用自：doi:10.16190/j.ki.45-1211/r.2012.04.064）
a:28周时实验组一小鼠口底肿物(黑色方框内) ;b:小鼠口底肿物为鳞状细胞癌(he×200) ;c:小鼠双侧颌下淋巴结肿大(图中黑色箭头所指) ;d:淋巴结中已有转移灶( (he×200) ;e:淋巴结广谱细胞角蛋白染色阳性(ihc×200)。
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分类
产品名称
货号
规格
口腔癌动物建模试剂
4-nitroquinoline n-oxide 4-硝基喹啉-n-氧化物（4-nqo）
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250 mg/1/5g
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1.肉眼观察：小鼠精神状况、活动度、进食、饮水量、饮药量及毛色情况,每周记录小鼠体质量,饮水量,饮药量。每周掰开小鼠口腔观察口腔内变化,记录口腔内黏膜色泽,质地等是否改变,是否有斑块、溃疡或肿物出现。
2.h&e染色观察：处死小鼠后立即取全舌、牙龈、口底、颊、腭、唇、颌下淋巴结、颌下腺、食管、胃、肝、脾、肺、肾、小肠、大肠等组织，进行h&e染色，做病理学观察。
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