ELISA试剂盒在实验遇到的一些问题和解决办法

elisa试剂盒实验以灵敏度较高、特异性较好的特点在实验上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对实验的检测作用影响较大,如不留意,有或许导致显色不全、花板等结果。下面我们谈谈操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法。
一 挑选elisa试剂盒:
挑选质量的检测试剂,严格依照试剂阐明书进行操作,操作前将试剂在室温下平衡30-60分钟。
二 加样或许原因:
1)血清或血浆标本分离欠好即进行加样;
2)手工操作中,加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时刻过长(特别是室内温度较高时);
3)加完标本再加酶试剂时酶溅起孔外。
解决办法:
1)标本为血清:将血液先天然寄存1-2小时后,再用3000rmp离心15分钟;标本为血浆:有必要运用含抗凝剂的血液标本收集管,采血后有必要立即颠倒*混合5-10次,放置一段时刻后,3000rpm离心15分钟;若在几天内检测,可放在2-8℃冰箱中,若要储存,则置于-20℃的低温冰箱内。
2)加样后及时放入孵箱。
3)假如选用at或其他全自动加样,挑选fame或其他后处理仪器加酶试剂。
4)标本较多时,请分批操作。
三 孵育或许原因:
1)孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸腾,吸附于孔壁,难于清洗*;
2)孵育时刻人为延长,导致非特异性结合紧附于反响孔周围,难以清洗完*办法:
1)贴封片或加盖;
2)按阐明步骤严格控制操作时刻。

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