脆弱拟杆菌探针法荧光定量pcr试剂盒操作流程:
1. 根据要保存的各样本的体积,计算出所需rnawait用量。rnawait的用量应当是组织体积的10倍(如100mg组织约用1ml rnawait);离心收集2×106细胞rnawait的用量是1ml。
2. 将rnawait按需要量分装入自备保存管中;
3. 快速将较大的组织切成厚度<0.5 cm的任意片状,立即*浸入rnawait中。组织的厚度一定要<0.5 cm。组织过厚则rnawait不能有效渗入,组织中间部位的rna不能受到保护。较小的组织(如大鼠的肾脏、脾脏,小鼠的大部分器官)取下后可以直接浸入rnawait。
4. 保存时先将样本浸入rnawait后置4℃冰箱过夜(4℃过夜是必需的,这样可使rnawait*渗入到组织中),然后转移到-20℃冰箱(rnawait在-20℃时仍为液态,有结晶析出,是正常情况);或者在4℃冰箱过夜后,从rnawait中取出组织块,转移到-80℃冰箱。在rnawait中保存的标本,反复冻融至室温20次不影响rna的质量。
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