实验操作：小鼠ELISA试剂盒中温育是放在哪温育呢?
实验操作：小鼠elisa试剂盒中温育是放在哪温育呢?
小鼠elisa试剂盒的操作要点
elisa的操作因固相载体的形成不同而有所差异，良好的仪器和正确的操作是保证elisa检测结果准确可靠的必要条件。国内医学检验一般均用板式点。本文将叙述板式elisa各个操作步骤的注意要点，珠式、管式及磁性球elsia，国外试剂均与特殊仪器配合应用，两者均有详细的使用说明，严格遵照规定操作，必能得出准确的结果。
本生小鼠elisa试剂盒操作步骤：
方法一 用于检测未知抗原的双抗体夹心法:
1. 包被：用0.05m ph9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。
2. 加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。
4. 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的tmb底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。
5. 终止反应：于各反应孔中加入2m硫酸0.05ml。
6. 结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：小鼠elisa试剂盒反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测o·d值：在elisa检测仪上，于450nm(若以abts显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔o·d值，若大于规定的阴性对照od值的2.1倍，即为阳性。
方法二 用于检测未知抗体的间接法：
用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜。次日洗涤3次。加一定稀释的待检样品(未知抗体)0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)0.1ml，37℃孵育30-60分钟，洗涤,zui后一遍用ddw洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
洗涤
洗涤在elisa过程中虽不是一个反应步骤，小鼠elisa试剂盒但却也决定着实验的成败。elsia就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。
小鼠elisa试剂盒本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。
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2. 加样：加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
3. 加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。
4. 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的tmb底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。
5. 终止反应：于各反应孔中加入2m硫酸0.05ml。
6. 结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：小鼠elisa试剂盒反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测o·d值：在elisa检测仪上，于450nm(若以abts显色，则410nm)处，以空白对照孔调零后测各孔o·d值，若大于规定的阴性对照od值的2.1倍，即为阳性。
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洗涤在elisa过程中虽不是一个反应步骤，小鼠elisa试剂盒但却也决定着实验的成败。elsia就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。
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